灭菌及无菌空气的制备.ppt

1、种子罐、发酵罐、计量罐、补料罐等的空罐及管道灭菌 从有关管道通入蒸汽，使罐内蒸汽压力达0.147Mpa。维持45min，灭菌过程从有关阀门排出空气，并使争取通过达到死角灭菌；灭菌结束，关闭蒸汽后，待罐内压力低于空气过滤器压力时，通入无菌空气保压0.098Mpa。 2、空气总过滤器和分过滤器灭菌 排出过滤器中空气，从过滤器上部通入蒸汽，并从下、下排气口排气，维持压力0.147Mpa，灭菌2h，灭菌完毕通入压缩空气吹干。 第31页，共51页，2022年，5月20日，10点24分，星期五 3、种子培养基实罐灭菌 从夹层通入蒸汽间接加热至80℃，再从取样管、进风管、接种管进蒸汽，进行直接加热，同时，关闭夹层蒸汽进口阀门，升温121℃，维持30min，谷氨酸发酵的种子培养基实罐灭菌为110℃，维持10min。 4、发酵培养基实罐灭菌 从夹层或盘管通入，蒸汽间接加热至90℃，再从取样管、进风管、接种管进蒸汽，进行直接加热，同时，关闭夹层蒸汽进口阀门，升温121℃，维持30min，谷氨酸发酵的种子培养基实罐灭菌为105℃，维持5min。 5、.发酵培养基连续灭菌 一般培养基为130℃，维持5min， 谷氨酸发酵培养基为115℃，6~8min。 第32页，共51页，2022年，5月20日，10点24分，星期五 第二节 空气除菌 城市上空空气中含有的细菌数为3000-10000个/m3，因此在空气引进发酵罐之前必须进行严格处理，除去其中含有的微生物和其他有害成分。 抗生素、氨基酸和酶制剂等多数品种发酵，耗氧量大，无菌程度要求十分严格. 一、通风发酵对无菌空气的要求 1.空气中微生物的分布 空气中含菌量随环境的不同而有很大的差异。 2.发酵对空气无菌程度的要求 一般按染菌机率为10-3来计算，即1000次发酵周期所用的无菌空气只允许1次失败。 第33页，共51页，2022年，5月20日，10点24分，星期五 空气除菌设备 空气过滤除菌的目的 Ns<10-3个/m3 ，同时使空气有一定压力 空气过滤除菌流程 普通空气冷却除菌流程 高效前置过滤除菌流程 第34页，共51页，2022年，5月20日，10点24分，星期五 高效前置过滤除菌流程 第35页，共51页，2022年，5月20日，10点24分，星期五 空气预处理流程 空气除菌总流程如下：高空采风→ 粗滤器→ 空压机→ 贮罐→冷却器→ 油水分离器　→ 丝网分离器→加热器→ 总过滤器→ 分过滤器 → 发酵罐 第36页，共51页，2022年，5月20日，10点24分，星期五 空气除菌方法 加热灭菌（220°C，20秒）[灭菌彻底，能耗大，成本高] 静电除菌[除菌效果差，仅用于初除菌] 辐射灭菌[254-265nm效果最佳，仅限表面灭菌] 介质过滤除菌[主流的除菌方式] 第37页，共51页，2022年，5月20日，10点24分，星期五 空气压缩机余热灭菌图 第38页，共51页，2022年，5月20日，10点24分，星期五 过滤除菌(Filter sterilization)及其控制 按除菌机制可分为： 1 绝对（表面）过滤 2 深层介质过滤 第39页，共51页，2022年，5月20日，10点24分，星期五 关于灭菌及无菌空气的制备 第1页，共51页，2022年，5月20日，10点24分，星期五 发酵工程无菌技术： 纯培养发酵技术：发酵全过程只有生产菌，无杂菌 第五章 灭菌及无菌空气制备 在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的不良后果： 杂菌污染使基质或产物被杂菌消耗，造成生产能力下降； 杂菌产生的某些代谢产物，改变了培养液的理化性质，使提取精制发生困难； 杂菌可能会降解目的产物，使得生产过程失败； 杂菌会污染最终产品； 发酵时如污染噬菌体，可使生产菌发生溶菌现象，使生产失败 第2页，共51页，2022年，5月20日，10点24分，星期五 为了保证培养过程的正常进行，在接种要培养的微生物之前，需要进行灭菌与消毒。 灭菌对象：培养基；设备与管道；空气系统；流加料、消泡剂； 必要时还有对生产环境进行消毒，防止杂菌和噬菌体 工业上具体措施包括： 1）使用的培养基和设备须经灭菌； 2）好氧培养中使用的空气应经除菌处理 3）设备应严密，发酵罐维持正压环境； 4）培养过程中加入的物料应经过灭菌； 5）使用无污染的种子。 第3页，共51页，2022年，5月20日，10点24分，星期五 消毒与灭菌在发酵工业中的应用 消毒(disinfection)：用物理或化学方法杀死物料、容器器具内外病原微生物，而对被消毒的物体基本无害的措施。一般只能杀死营养细胞，例