消毒灭菌肠道致病菌分离培养和抗酸染色.ppt

第1页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 一、消毒灭菌 物理因素对细菌的影响 2. 化学因素对细菌的影响 第2页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 （一） 物理因素对细菌的影响 高压蒸汽灭菌法 紫外线对细菌的影响 第3页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 高压蒸气灭菌法 原理：蒸汽被限制在密闭容器内，随着热力 的作用压力不断升高，蒸汽的温度也 相应升高，在103.4kPa蒸汽压力下 时，温度可达121.3℃。维持15-20分 钟后可杀死细菌包括芽孢在内的所有 微生物。 第4页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 高压蒸气灭菌器 1) 构造 高压蒸气灭菌器是一个双层的金属圆筒，两层之间盛水，外层坚厚，其上或前方有金属厚盖。盖旁附有螺栓，借以紧闭盖门，使蒸气不能外溢。 高压蒸气灭菌器上装有排气阀、安全阀，以调节器内压力，装有的温度计及压力表以示内部温度和压力。 器内装有带孔的金属搁板，用以放置欲灭菌对象。 第5页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 高压蒸汽灭菌法 压力：1.05kg/㎡ 或103.425KPa 温度: 121.3℃ 时间：15-20min 完全杀灭细菌的繁殖体和芽孢 用途：适用于耐高温、高压，不怕潮湿的物品， 如敷料、 手术器械、药品、细菌培养基等。 第6页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 2)使用方法 ①加水至锅内达规定的水平面，放入欲灭菌物品，把锅盖按对称的螺旋先后对称用力（切勿单个依次）扭紧，使锅盖确实均匀密闭。 ②用电炉加热，同时打开排气阀门，使器内冷空气逸出，待空气全部排出后，关闭排气阀。 ③继续加热并观察压力表，器内压力又逐渐升高，直到压力表指在所需数字（例如15磅）即调节热源，维持20～30min．可完全杀死细菌的繁殖体和芽胞。 ④灭菌时间到达后，停止加热，待压力自行下降至零时方可徐徐开放排气阀，排尽余气，打开锅盖，取出灭菌物品。 第7页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 3)注意事项 ①检查排气活塞及安全阀门，特别是压力表的性能是否正常，以免发生危险。 ②灭菌物品不应放置过挤，妨碍蒸气流通，影响灭菌效果。 ③灭菌开始时必须将器内冷空气完全排除，否则压力表上所示压力并非全部是蒸气压力，灭菌将不彻底。 ④灭菌过程中及灭菌完毕，灭菌后切不可排气过急，突然打开排气阀门放气减压，以免瓶内液体外溢或者破裂。 第8页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 全自动高压蒸汽灭菌锅 第9页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 台式蒸汽灭菌器 BA-30 第10页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 Systec D-200 2D 双门高压灭菌器 电热卧式圆形压力蒸汽灭菌器(型号YXQ-WY21-600) 第11页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 全自动喷淋式高温高压调理杀菌锅 第12页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 电脑全自动水浴式串联杀菌锅 第13页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 紫外线对细菌的影响 原理：紫外线主要作用于DNA，使一条DNA链上的两个相邻胸腺嘧啶以共价键结合成二聚体，从而干扰DNA的复制与转录导致细菌变异或死亡。对病毒也有破坏作用。 特点：紫外线杀菌作用强，而穿透能力弱。普通 玻璃、纸张、水蒸气、尘埃等均能阻挡。 紫外线中波长为240-300nm者具有杀菌能 力，其中265-266nm的杀菌作用最强。 用途：常用于消毒物体表面，手术室无菌实验 室，传染病房的空气消毒及不耐热物品消毒。 第14页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 紫外线对细菌的影响 方法：取一个平皿，用密涂法将细菌涂布于培养皿中，然后按图所示揭开平皿盖，置于紫外线下照射30分钟，然后盖好盖子，置37℃培养24h后取出观察结果。 纸片 平皿盖 滤纸片用后需要用火烧掉 每个实验室4个平板 第15页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 密涂接种 分三次接种，每次取一环。第一次密涂接种后旋转60度二次密涂接种，然后同方向旋转60度后再次密涂接种。 第16页，共38页，2022年，5月20日，6点27分，星期五 1. 促进菌体蛋白质变性或凝固;