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一、培养基的类型
培养基是指利用人工方法配制的供微生物、植物和动物细胞生长繁殖或积累代谢产物的各种营养物质的混合物。
培养基组成对菌体生长繁殖、产物的生物合成、产品的质量和产量、产品的分离精制都有重要的影响。
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1、按培养基成分
1)合成培养基
所用原料的化学成分明确、稳定 如葡萄糖、硫酸铵
用于实验室范围作有关营养、代谢、分类鉴定、 选育菌种、遗传分析定量研究工作;在生产某些疫苗的过程中,为了防止其他蛋白质等杂质掺入,也常用合成培养基;
营养单一、价格较高,不适于大规模生产
2)天然培养基
原料是一些天然动、植物产品 如花生饼粉、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、麦芽汁、玉米浆等
来源广泛(大多为农副产品)、营养丰富、价格低廉、适于工业化生产
一般不需要另加微量元素、维生素等物质
由于成分复杂,不易重复,如对原料质量等方面不加控制会影响生产稳定性
3)半合成培养基
既含天然成分,又含纯化学试剂
发酵工业中使用的培养基绝大多数是半合成培养基
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2、按物理状态分
1)固体
适于菌种和孢子的培养与保存,传统发酵食品的生产,也广泛应用于有子实体的真菌类,如香菇、木耳等的生产;
近年来由于机械化程度的提高,在发酵工业上又开始应用固体培养基进行大规模生产,其组分常用麸皮、大米、小米、木屑、禾壳等。
2)半固体
琼脂0.5%-0.8%
主用于鉴定细菌、观察细菌运动特征及噬菌体的效价测定等
3)液体
发酵工业大规模使用的培养基
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2.发酵培养基的成分及来源
培养基通常都含有微生物生长繁殖所必须得碳源(能源)、氮源、无机盐、生长因子和水等营养成分。有些还含有前体、产物促进剂和抑制剂等。
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一、碳源
凡是作为微生物细胞结构或者代谢产物中碳架来源的营养物质,都称为碳源。
主要功能:
1)为菌体的生长繁殖提供能源和合成菌体所必需的成分;
2)为合成目的产物提供所需的碳元素成分
一、碳源
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常用的碳源:
特殊情况下(如碳源贫乏时),蛋白质水解物或氨基酸等也可被微生物作为碳源使用。
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1、糖类
发酵培养基中使用最广泛的碳源;
主要有葡萄糖、糖蜜和淀粉糊精等
糖类
来 源
葡萄糖
乳糖
淀粉
蔗糖
纯葡萄糖、水解淀粉
纯乳糖、乳清粉
大麦、木薯、红薯、玉米、马铃薯等
甜菜糖蜜、甘蔗糖蜜、粗红糖、精白糖等
工业上常用的糖类及来源
淀粉水解糖的制备是发酵生产的一项重要工艺,将在后面详细介绍
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葡萄糖
最易利用,几乎所有微生物都能利用
葡萄糖常作为培养基的一种主要成分。
但过多的葡萄糖会过分加速菌体的呼吸,以至培养基中的溶解氧不能满足需要,抑制微生物的生长和产物的合成。
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糖蜜
制糖的结晶母液,它是制糖工业的副产物;
含有丰富的糖、氮类化合物、无机盐和维生素等,是微生物发酵培养基价廉物美的碳源;
糖蜜主要含有蔗糖,总糖可达45-50%。水分含量:18-36%。粗蛋白质含量2.5-8%,粗灰分4%-12.5%。
糖蜜分甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜,二者在糖的含量和无机盐的含量上有所不同,即使同一种糖蜜由于加工方法不同其成分也存在差异,因此使用时要注意。
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淀粉
多糖,也是常用的碳源;
需经胞外酶水解成单糖后再被吸收利用;
使用淀粉可克服葡萄糖代谢过快的弊病,价格也比较低廉,在发酵工业中被普遍使用。
常用的淀粉为玉米、甘薯、马铃薯、木薯淀粉。
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油和脂肪也能被许多微生物作为碳源和能源
这些微生物都具有比较活跃的脂肪酶,在脂肪酶的作用下,油或脂肪被水解为甘油和脂肪酸,在溶解氧的参与下,进一步氧化成CO2和H2O,并释放出大量的能量。
当微生物利用脂肪作为碳源时,要供给比糖代谢更多的氧,不然大量的脂肪酸和代谢中的有机酸会积累,从而引起pH的下降,并影响微生物细胞中酶的活力。
常用豆油、菜油、葵花籽油、猪油、鱼油、棉籽油等
2、油和脂肪
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随着石油工业的发展,发酵工业的碳源也有所扩大。
正烷烃(一般指从石油裂解中得到的14-18碳的直链烷烃混合物)已用于有机酸、氨基酸、维生素、抗生素和酶制剂的工业发酵中。
3、烃和醇类
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二、氮源
有机氮源
豆饼(粕)粉、花生饼粉、鱼粉、蚕蛹粉、酵母粉、玉米浆、尿素等
无机氮源
铵盐、硝酸盐等
(由于细胞内的含氮物质都以氨基或亚氨基的形式存在,故铵态氮可以直接用于合成细胞物质;而硝态氮需还原成氨后才能被利用)
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氮源物
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