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大肠菌群检验原始记录(平板计数法)
检验单位
xxxx公司 检验室
检验员
张xx
检验日期
2022-xx-xx至2022-xx-xx
环境条件
温度 xx ℃,相对湿度(RH) xx %
检验依据
GB4789.2-2016 《食品安全国家标准食品微生物学检验 大肠菌群计数》第二法
检验编号xx
样品名称
xxxx
样品批次
2022xxxx
仪器设备及耗材:
天平:( xxxx) 洁净工作台: (xxxx)
培养箱: ( xxxx)
培养基及试剂:
结晶紫中性红胆盐琼脂培养基(VRBA): xxxx 配制日期2022/xx/xx
煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLB): xxxx 配制日期2022/xx/xx
磷酸盐缓冲液:xxxx 配制日期2022/xx/xx
0.1mol/L氢氧化钠: 配制日期:2022/xx/xx
实验过程:
1.样品处理和稀释:
1.1 如需要,使用0.1mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸将样品调整pH在6.5~7.5之间。
1.2 制备样品稀释液
根据样品状态,无菌操作,称取/吸管吸取 25g(mL)样品,加入到 225mL 无菌磷酸盐缓冲液中均质(混匀),制成 1:10 样品匀液。根据对样品污染情况的估计,按上述操作将样品稀释至所需浓度。
2.接种VRBA
选择适宜的2~3个连续稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),吸取1mL于无菌平皿内,每个稀释度接种两个平皿。同时分别吸取1 mL 稀释液加入两个无菌平皿内作为空白对照。及时用15~20mL不超过46℃的VRBA倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀,待琼脂凝固后,再加3~4mL VRBA覆盖平板表层。同时再以只加 VRBA 的平皿,作为 VRBA 的空白对照。将平板翻转,培养。
3.培养
将以上 VRBA 平板倒置于36.0±1℃,培养18h~24h(2022/xx/xx xx时~2022/xx/xx xx时) 并分别计数可疑和典型菌落。
4.证实试验(接种BGLB)
选取菌落数在15~150CFU之间的平板,从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落,少于10个菌落的挑取全部典型和可疑菌落,分别移种于BGLB肉汤管内,36℃±1℃培养24h~48h,观察产气情况。
5.结果与报告
5.1 按“四舍五入”原则修约,保留 2 位有效数字,无菌落生长以<1 乘以最低稀释倍数报告。
5.2 称重取样以 CFU/g 为单位报告,体积取样以 CFU/mL 为单位报告。
样品1
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CFU/mL 或CFU/g
10-1
10-2
10-3
VRBA疑似大肠菌群菌落数
30
28
3
4
0
0
230
接种BGLB管数
10
0
0
BGLB阳性管数
8
样品2
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CFU/mL 或CFU/g
10-1
10-2
10-3
VRBA疑似大肠菌群菌落数
22
20
3
2
0
0
150
接种BGLB管数
10
0
0
BGLB阳性管数
7
样品3
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CFU/mL 或CFU/g
10-1
10-2
10-3
VRBA疑似大肠菌群菌落数
20
28
2
3
0
0
190
接种BGLB管数
10
0
0
BGLB阳性管数
8
样品4
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CFU/mL 或CFU/g
10-1
10-2
10-3
VRBA疑似大肠菌群菌落数
24
26
3
2
0
0
150
接种BGLB管数
10
0
0
BGLB阳性管数
6
样品5
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CFU/mL 或CFU/g
10-1
10-2
10-3
VRBA疑似大肠菌群菌落数
20
22
1
2
0
0
150
接种BGLB管数
10
0
0
BGLB阳性管数
7
空白
VRBA空白(仅VRBA)
-
-
阴性
稀释液空白(稀释液+VRBA)
-
-
阴性
BGLB空白(仅BGLB)
-
-
阴性
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