虾青素分析测定方法的研究.doc

虾青素剖析测定方法的研究 科学技术与应用罗玉芳约3713字【纲要】选择分光光 度法及高效液相色谱法对测定虾青素的剖析条件进行研究 进而得出最正确的测定条件。用分光光度法和高效液相色谱法 测定虾青素标准曲线的回归方程的R2都超出了0.99。用分 光光度法测定虾青素回收率范围为99.3-101相对标准误差 RSD值为用液相色谱法测定虾青素回收率范围为 100-102相对标准误差RSD为。这些值都在定量分 析所要求的阈值范围内能够用于定量剖析。【重点词】分 光光度法高效液相色谱法虾青素 AbstractChoicetwo basedonthespectrophotometryandhighperformance liquidchromatographyHPLCweredevelopedfor determinationtheastaxanthin.Andtheoptimum conditions wasinvestigated indetail. Thetotal amount ofastaxanthinwasmeasuredbyspectrophotometrythe recoverieswereintherangeof99.3-101andRSDwere determined byHPLCandthe recoveries werein the range of100-102 RSDwereinthe rangeof0.62-1.4. All these valueswerewithintherangeofpermissivethreshold valueonquantitativeanalysiswhichshowedthatit ’ sfeasible formeasuringthecontent ofastaxanthinby thesetwomethods.Keywords: spectrophotometryHPLCastaxanthin  从动植物及菌类中提 取虾青素当前还处于实验研究的基础阶段要实现家产化生 产虾青素还一定对其提取工艺进行宽泛深入的研究。要展开 这方面的研究一定成立起迅速、高效、简易的虾青素剖析方 法。虾青素是一种类胡萝卜素1分光光度法和高效液相色谱 法是常用的两种类胡萝卜素剖析方法23这两种方法各有特 点类胡萝卜素分子因其分子构造中的共轭双键系统及离域化的π电子在可见光区表现出强汲取带且每种类胡萝卜素 分子的最大汲取峰地点与紫外可见光光谱的精美构造都是拥有特色性的。因为类胡萝卜素分子的这类光汲取性质溶液 中的类胡萝卜素一般听从Beer-Lambert定律因此经过分光 光度法可实现对其精准的定量剖析4高效液相色谱法拥有分 离速度快在线检测如UV检测器敏捷度高等长处是美国NFIA 美国饲料协会规定的测定方法。本工作旨在经过对分光光度法和液相色谱法测定虾青素的研究进而成立迅速、有效、准 确的测定虾壳中虾青素的方法。一、资料和方法一资料1 仪器721型分光光度计上海精科食品厂高效液相色谱仪日 本岛津企业18色谱柱250mm×4.6mm迪马企业恒温箱 202-1型上海市上海县试验仪器厂JA2003上皿电子天平 上海天平仪器厂2试剂虾青素标准品剖析纯美国sigma企业 乙腈色谱纯甲醇、无水乙醇、二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、 石油醚等均为剖析纯。二实验方法1分光光度法正确称取 必定量的虾青素纯样品多份分别用乙醇有机溶剂溶解后各 自配制成1.0μg/mL、2.0μg/mL、3.0μg/mL、4.0μg/mL、 5.0μg/mL、6.0μg/mL的标准溶液用721型分光光度计测定 不一样波长下的吸光度。在最大波长下以试剂空白调零测其吸 光度。以虾青素标准溶液的浓度为横坐标对应的吸光值为 纵坐标绘制标准曲线。2高效液相色谱法1.色谱工作条件 色谱柱C18250mm×4.6mm。流动相乙醇甲醇二氯甲烷 751510V/V流速为1.0mL/min。柱温室温。检测波长为480nm 进样量20μL。2.标准工作曲线绘制称取必定量的虾青素 标准溶液用甲醇配制浓度分别为1.0μg/mL、2.0μg/mL、 4.0μg/mL、6.0μg/mL、8.0μg/mL、10.0μg/mL标准溶液 分别取20μL进样依据峰面积与相应的浓度进行线性回归绘 制标准工作曲线。二、结果与剖析一分光光度法剖析虾青 素  1  虾青素标准样品在乙醇溶剂中的最大汲取波长  我们将 虾青素标准样品溶解在乙醇溶剂中在  400nm至  700nm范围 内测其吸光度结果如图1。从图中能够看出虾青素标准样品 在乙醇溶剂中的最大汲取波长为474nm。图片2虾青素标 准样品在乙醇有机溶剂中的标准曲线正确称取必定量的虾 青素纯样品多份分别用乙醇有机溶剂溶解