遗传的物质基础.pptVIP

反向重复序列 回文序列（palindrome）形成发夹结构，十字形结构，是限制酶的酶切位点。 第23页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 A-DNA 相对湿度75％以下，右手双螺旋，双链反向平行，每周螺旋10.9对碱基，螺距0.26nm ，碱基平面不与螺旋轴垂直，大沟极深 五、DNA双螺旋结构的基本形式 第24页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 B－DNA 天然状态DNA，相对湿度92％。右手双螺旋，每周螺旋10对碱基(10.4)，螺距3.4nm，碱基平面与螺旋轴垂直，大沟宽而深。 第25页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 Z－DNA 左手双螺旋，每圈螺旋12对碱基，螺距4.6nm，碱基平面与螺旋轴不垂直，无大沟，小沟深而窄 第26页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 其他 形式 四链DNA 第27页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 三链DNA 一条DNA链为全嘌呤，另一条链为全嘧啶的区段产生，结果一条嘌呤链和两条嘧啶链构成，H-DNA. 与DNA 的复制可能有关。 第28页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 一条嘌呤和两条嘧啶链构成，(YR*Y) CG*C，TA*T 星号左边的碱基正常配对，右边的碱基异常配对 第29页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 或两条嘌呤和一条嘧啶链构成 (YR*R) CG*G，TA*A，CG*A。 G G G A C A A T C 第30页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 六、DNA的变性和复性 变性：热，试剂，氢键、碱基堆积力破坏，DNA由双链变成单链 温度：80～100℃ 变性剂：尿素，甲酰胺 增色效应（hyperchromicity） 正常双链（50μg/ml） A260=1.00 完全变性的单链DNA A260=1.37 单核苷酸 A260=1.60 DNA双螺旋结构失去一半时，A260=1.185 第31页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 Tm值的影响因素： DNA的均一性 均一性高，Tm值的范围小 G-C含量 G-C含量高，Tm值高 经验公式 G-C%=(Tm-69.3)×2.44 介质中的离子强度 低离子强度易熔解变性 DNA保存在高浓度缓冲液中防变性（TE） 第32页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 复性 单链重新缔合为双螺旋的过程，一般比Tm低20～25℃下进行复性 过程：复性时溶液中单链DNA随机碰撞。GC先配对形成短的双链，然后配对区域延伸，象拉链一样 复性产生的不一定是原有的互补链，非原配 第33页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 影响DNA复性的因素： DNA复杂性 简单序列复性快 DNA浓度 高浓度复性快 DNA片断 片断小复性快，移动碰撞机会多 温度 过低温度减少互补链的碰撞机会 盐浓度 过低盐浓度使复性后的DNA又变性 第34页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 杂交： 不同来源的单链核酸经碱基互补配对而形成的双螺旋，DNA-DNA, DNA-RNA DNA杂交可反映不同生物中DNA的共同序列和不同序列，研究生物的进化， 核酸杂交是现代分子生物学的基础 第35页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 液相杂交 第36页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 滤膜杂交 第37页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 Cot曲线 DNA复性时的单链消失的速度 1 C/Co=―――― 1+KCot C：单链DNA浓度，Co：DNA总浓度，t：时间秒，k：=二级反应常数 复性的分数C/Co是起始浓度和经过时间的乘积（Cot）的函数。 第38页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 第1页，共54页，2022年，5月20日，14点19分，星期六 教学目的 ： 学习分子遗传学的基本理论，重点是遗传物质在分子水平上的遗传信息流向和基因表达调控。利用分子遗传学的基本理论指导相关科研工作