氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量检测试剂盒说明书.PDFVIP

Beijing Solarbio Science Technology Co., Ltd Tel: 400-968-6088 Fax: 010 Http:// 氧化型谷胱甘肽（GSSG ）含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法 货号：BC1180 规格：50T/48S 产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。 试剂名称 规格 保存条件 试剂一 液体 50 mL×1 瓶 4℃保存 试剂二 液体 170 μL×1 支 4℃保存 试剂三 液体 60 mL×1 瓶 4℃保存 试剂四 液体 8 mL×1 瓶 4℃保存 试剂五 粉剂×1 瓶 4℃保存 试剂六 液体 40 μL×1 瓶 4℃保存 标准品 粉剂 10 mg×1 支 4℃保存 溶液的配制： 1、试剂二：有毒易挥发试剂，涉及该试剂的步骤建议在通风橱内操作。 2 、试剂五：临用前加入 8 mL 蒸馏水，溶解后-20℃分装保存； 3、试剂六：液体置于试剂瓶内EP 管中。临用前根据样本量将试剂六、蒸馏水按 1:20 （V:V ）的比例配制备用， 现用现配； 4 、标准品：用 1 mL 蒸馏水溶解，浓度为 10 mg/mL，4℃保存。 产品说明： 氧化型谷胱甘肽（GSSG ）是谷胱甘肽（GSH ）的氧化形式，又称为二硫代谷胱甘肽，是两分子的谷胱甘肽 氧化而成。GSSG 会被谷胱甘肽还原酶还原成 GSH ，因此机体中大多数是以还原型形式存在。测定细胞内 GSH 和 GSSG 含量以及 GSH/GSSG 比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。本试剂盒利用谷胱甘肽能和5,5’- 二硫代-双- （2-硝基苯甲酸）（5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB ）反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸，2-硝基-5- 巯基苯甲酸在波长 412nm 处具有最大光吸收的特点，通过 2- 乙烯吡啶抑制样本中原有的还原型谷胱甘肽，然后利 用谷胱甘肽还原酶将 GSSG 还原为 GSH ，借此测定氧化型谷胱甘肽的含量。 技术指标： 最低检出限：1.369 μg/mL 线性范围：1.5625-50 μg/mL 注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。 需自备的仪器和用品： 分析天平、匀浆器/研钵、低温离心机、水浴锅、移液器、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿。 第 1 页，共 3 页 操作步骤： 一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） （1）组织处理 新鲜组织首先用 PBS 冲洗 2 次，然后称取动物组织或者植物组织 0.1g 。加入用试剂一润洗过的匀浆器中（匀 浆器提前放冰上预冷）；然后加入 1mL 试剂一（组织/试剂一比例保持不变即可），迅速冰上充分研磨（使用液氮 研磨效果更好）；8000g，4℃离心