细菌内毒素检测方法验证方案.pdfVIP

- 细菌毒素检测法验证案 起 草 人 起草日期 审 核 人 审核日期 批 准 人 批准日期 **力邦 制 药 有 限 公 司 细菌毒素检测法验证案 目的 围 责任人 容 1.实验材料及用具 2 实验准备 3.具体验证步骤 3.1.鲎试剂灵敏度复核 3.2..干扰实验 3.3.供试品细菌毒素检查 4. 验证结论 附： 表1.鲎试剂灵敏度复核记 . z. - 表2. 干扰试验记录 表3.细菌毒素检查记录 细菌毒素检测法验证案 目的：为确保盐酸罗哌卡因一水合物细菌毒素检测法的专属性、灵敏 度，保证检测结果可符合质量标准要求，特制定此案。 围：盐酸罗哌卡因一水合物细菌毒素检测法 责任人：细菌毒素检验员、QC主管 容： 1.实验材料及用具 1.1.电子天平 1.2.电热枯燥箱 1.3.恒温水浴箱 1.4.水银温度计 1.5.旋涡混合器 1.6.鲎试剂〔具有主管部门的批准文号〕 1.7.细菌毒素工作标准品(由中国药品生物制品检定所统一发放的标 准品) 1.8.细菌毒素检查用水 1.9.实验用具:移液管、凝集管、三角瓶、试管、试管架、洗耳球、时 钟、75%酒精棉、剪刀、砂轮。 2 实验准备 2.1.玻璃器皿的洗涤将玻璃器皿放入铬酸洗液或其他热原灭活剂或清 . z. - 洗液中充分浸泡，然后取出将洗液空干，用自来水将残留洗液彻底洗 净，再用蒸馏水反复冲洗三遍以上，空干后放入适宜的密闭金属容器 中或用锡箔纸包好后再放入金属容器，放置入烤箱。 2.2.除去玻璃器皿外表可能存在的外源性毒素玻璃器皿置烤箱后，将 烤箱调至250℃，待烤箱温度升至设定的温度后开场计时，干烤至少 1小时。到达规定时间后，关断电源，待烤箱温度自然降至室温。在 不翻开金属容器的情况下，可在两天使用；如果玻璃器皿用锡箔纸包 装，在不翻开包装的情况下可在两使用，否则须再次干烤 除去可能存在的外源性毒素。 3.具体验证步骤 3.1.鲎试剂灵敏度复核 .实验操作 3.1.1.1.细菌毒素标准溶液的制备 取细菌毒素工作标准品一支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，然后用砂 轮在瓶颈上部轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开，启开过程中应防 止玻璃屑落入瓶。 按照标准品说明书，参加规定量的细菌毒素检查用水溶解其容物，用 封口膜将瓶口封，置旋涡混合器上混合15分钟。然后进展稀释，制备 成4个浓度的细菌毒素标准溶液，即2λ、λ、0.5λ、0.25λ〔λ为 所复核的鲎试对的标示灵敏度〕，每稀释一步均应在旋涡混合器上混 合30秒钟。 .2.待复核鲎试剂的准备 . z. - 取规格为0.1ml/ 支的鲎试剂18 支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，用砂 轮在瓶颈轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开备用，防止玻璃屑落入 瓶。每支参加0.1ml检查用水溶解，轻轻转动瓶壁，使容物充分溶解， 防止产生气泡。 3.1.1.3.加样 将已充分溶解的待复核鲎试剂18 支〔管〕放在试管架上，排成5列， 其中4 列4 支〔管〕，1列2 支〔管〕。4 支〔管〕4 列每列每支分别参 加0