细胞合适的培养基.docxVIP

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细胞合适的培养基 培养细胞的重要环节有很多,其中很重要的一步就是为细胞选择适合 的生长环境,为其选择成分适合又营养丰富的细胞培养基。细胞培养 基是供给细胞营养、维持细胞生长和增殖的多种营养物质的混合物, 种类一般包括经典/基础培养基、无血清培养基以及化学成分确定的 培养基等。这其中又以经典/基础培养基最为常用。 经典/基础培养基属于合成培养基,是根据天然培养基的成分,用化 学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基,其主要成分有氨基酸、 碳水化合物、无机盐、维生素及其他辅助成分,比方DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12,这些都是应用非常广泛的经典/基础细胞 培养基。 接下来为你详细介绍一下这些培养基以及适用的细胞类型: .RPMI-1640 Medium: RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生 的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。主要 用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9 等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考 使用。 .Minimum Essential Medium (MEM): 也称最低必需培养基,它仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种 维生素。成分简单,可广泛适应各种已建成细胞系和不同地方的哺乳 动物细胞类型的培养。MEM-Alpha 一般用于培养一些难培养细胞类 型,而其它没有特殊之处的细胞株那么几乎均可采用MEM来培养。 .DMEM.高糖(标准型): 是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养,更适 合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来 生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转 化细胞的培养。 .DMEM-低糖(标准型): 是一种应用十分广泛的培养基,可用于许多哺乳动物细胞培养。低糖 适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿 瘤细胞培养。 5.DMEM/F12: DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂,含 有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM/F12培养基 (DME/F12medium),作为开发无血清配方的基础,以利用F12含 有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养 基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力,改良之一是在DMEM/F12(1:1)中加入15mM HEPES 缓冲液。 .McCoys 5A: McCoys 5A Medium主要为肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如 骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代移植物的生长,除适于一般的原代 细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些 难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴 细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。 .lscoves Modified Dulbecco Medium (IMDM): Guilber 和 Iscove 将 DulbeccoMedium 改良为 Iscoves Medium, 用于培养红细胞和巨噬细胞前体。此种培养液含有硒、额外的氨基酸 和维生素、丙酮酸钠和HEPES。并用硝酸钾取代了硝酸铁。IMDM 还能够促进小鼠B淋巴细胞,LPS刺激的B细胞,骨髓造血细胞,T 细胞和淋巴瘤细胞的生长。IMDM为营养非常丰富的培养液,因此可 以用于高密度细胞的快速增殖培养。 .M-199 Medium: 1950年,Morgan成功研制出具有确定化学成分的细胞培养液,即 M-199,主要用于鸡胚成纤维细胞培养。此培养液必须辅以血清才能 支持长期培养。M-199可用于培养多种种属来源的细胞,并能培养转染的细胞。 .Leibovitz Medium (L-15): L-15培养液适用于快速增殖瘤细胞的培养,用于在C02缺乏的情况 下培养肿瘤细胞株。此培养液采用磷酸盐缓冲体系,氨基酸组成进一 步改良,并由半乳糖替代了葡萄糖。 .HamsF-1O培养基:适应小鼠细胞、人类二倍体的培养。 .Hams F-12 培养基: 可以在加入很少血清的情况下应用,特别适合单细胞培养和克隆化培 养,是无血清培养中常用的基础培养液。 .Williams Medium E:用于大鼠肝上皮细胞的长期细胞培养。 .MCDB 131培养液:用于培养内皮细胞。 .0pti-MEM I Reduced Serum Media:用于培养造血细胞。 在确定培养基种类后,还会遇到培养基有不同分型的情况。那么对于 经典培养基中不同成分的作用及选择原那么又是什么呢?请往下看?.葡萄糖(Glucose): 作用:细胞生长所需的主要能量来源。 如何选择不

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