细胞的基本培养技术.pptxVIP

会计学;培养操作基本要领和要求（1）;培养操作基本要领和要求（2）;第3页/共50页;模拟实验（1）;1）培养前准备：制定实验计划和操作程序。 2）超净台要用75%酒精擦洗，然后紫外线消毒30分钟，工作台面上用品不要过多或重叠放置。 3）个人进入无菌培养室原则上须彻底洗手并按外科手术要求着装，开始操作前要用75%酒精或0.2%新洁而灭消毒手和前臂。 4）实验中需保持无菌操作要求。实验前要点燃酒精灯，烧过的器械要注意冷却，以防细胞损伤。 5）分别使用不同吸管吸取营养液、PBS、细胞悬液及其它各种用液，而不能混用 6）不要用手触及已消毒的器皿，如已接触，要用火焰灼烧或取备用品更换。 7）注意操作时勿大声讲话或咳嗽。;Section 3：细胞的基本培养技术;动物细胞培养过程图解;原代培养 Primary culture;含义:包含①原代培养实质是初次培养，即培养物接种到培养器皿  中就不再分割，任其生长繁殖②原代培养中的“代” 并不是指细胞繁殖的“代”数③原代培养过程中不分割培养物 不等于不更换培养液 建立方法:组织块法；分散(细胞悬液）法 时间: 一般1~4周 ;1、取 材;;;;问题： 原代培养时，如何实现细胞的分离和接种？;（1）细胞悬液的分离方法;（2）组织的解离方法;（3）解离细胞;A. 机械法解离细胞;;;B. 消化法解离