八种常用生化实验步骤.docx

试验一 基因的 PCR 扩增技术 一、试验目的与原理简介 聚合酶链式反响〔polymerase chain reaction〕是体外克隆基因的重要方法，它可在几个小时内使模板分子扩增百万倍以上。因此能用于从微量样品中获得目的基因，同时完成了基因在体外的克隆，是分子生物学及基因工程中极为有用的争辩手段。 常规 PCR 反用于DNA 序列的扩增，具体可分为三个主要过程：一、变性。通过上升温度使 DNA 双链模板分子中氢断裂，形成单链DNA 分子，温度为 94℃，时间 1min。二、复 性。降低温度使DNA 单链分子同引物结合。温度为55℃，时间1min。三、延深。上升温度， 在 DNA 聚合酶最正