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第四章 聚糖的结构与功能Stucture and Function of Glycan单糖糖类多糖糖蛋白(glycoprotein)糖复合物(glycoconjugates)蛋白聚糖(proteoglycan)糖脂(glycolipids) 概 述 细胞中存在着多种各异的含糖的复合生物大分子，主要包括糖蛋白(glycoprotein)、蛋白聚糖(proteoglycan)和糖脂(glycolipid)等，统称为复合糖类，又称为糖复合物(glycoconjugate) 。组成复合糖类中的糖组分（除单个糖基外），称为聚糖糖蛋白和蛋白聚糖都由共价连接的蛋白质和聚糖两部分组成。糖蛋白分子中蛋白质重量百分比大于聚糖；而蛋白聚糖中聚糖所占重量在一半以上。第一节糖蛋白分子中聚糖及其合成过程糖蛋白一种或多种糖以共价键连接到肽链上的蛋白质。蛋白质含量较多，糖所占比例变动大，表现为蛋白质的特性。主要分布细胞膜、溶酶体、细胞外液糖蛋白含糖量和聚糖结构差异显著特点：蛋白质含量较多；含糖量变动大；聚糖结构差异显著。组成糖蛋白的分子中聚糖的单糖有7种葡萄糖(Glc)半乳糖(Gal)甘露糖(Man)N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)岩藻糖(Fuc)N-乙酰神经氨酸(NeuAc) 糖蛋白的聚糖与糖蛋白的蛋白质连接方式不同可将分为N-连接型和O-连接型N-连接：连接方式O-连接：一、N-连接糖蛋白的糖基化位点为Asn-X-Ser/Thr N-连接糖蛋白：聚糖中的N-乙酰葡糖胺与多肽链中天冬酰胺的酰胺氮以共价键连接形成N-连接糖蛋白。并非糖蛋白分子中所有天冬酰胺残基都可连接聚糖。只有特定的氨基酸序列，Asn-X-Ser/Thr（X是脯氨酸以外的任何氨基酸）组成的序列有可能。N-连接糖蛋白中Asn-X-Ser/Thr三个氨基酸残基的序列子称为糖基化位点。糖蛋白分子中聚糖结构的不均一性称为糖型(glycoform)。二、N-连接聚糖结构有高甘露糖型、复杂型和杂合型之分 ①高甘露糖型②复杂性都有一个五糖核心③杂合型ManAsnManGlcNAcGlcNAcMan三、N-连接寡糖的合成是以长萜醇作为聚糖载体 N-连接寡糖是在内质网上以长萜醇作为聚糖载体，先合成含14糖基的寡糖链，然后转移至肽链的糖基化位点上，进一步在内质网和高尔基体进行加工而成。 每一步加工都由特异的糖基转移酶或糖苷酶催化完成，糖基必须活化为UDP或GDP的衍生物。四、O-连接聚糖合成不需聚糖载体定义O-连接糖蛋白：聚糖中N-乙酰半乳糖胺与多肽链的丝/苏氨酸残基的羟基以共价键相连而成为O-连接糖蛋白。 O-连接聚糖结构O-连接聚糖常由N-乙酰半乳糖胺与半乳糖构成核心二糖，核心二糖可重复延长及分支，再接上岩藻糖、N-乙酰葡萄糖胺等单糖O-连接糖蛋白结构特点：聚糖中的N-乙酰半乳糖胺与多肽链中丝氨酸或苏氨酸残基的羟基以共价键连接形成O-连接糖蛋白。连接部位通常在丝氨酸或苏氨酸较集中且有脯氨酸的序列中，但确切的序列还不清楚。O-连接聚糖常有一个二糖的核心。O-连接聚糖合成 O-连接聚糖在GalNAc转移酶（N-乙酰半乳糖胺转移酶的作用下），将UDP-GalNAc中的GalNAc基转移至多肽链的丝/苏氨酸的羟基上，形成O-连接，然后逐个加上糖基直至O-连接聚糖链的形成。整个过程在内质网开始，到高尔基体内完成。O-连接聚糖是在多肽链合成后进行，无需载体。五、蛋白质β-N-乙酰葡萄糖胺的糖基化是可逆的单糖基修饰β-N-乙酰氨基葡萄糖胺的单糖基化修饰，主要发生于膜蛋白和分泌蛋白。蛋白质O-GlcNAc糖基化修饰是通过O-GlcNAc糖基转移酶(O-GlcNAc transferase, OGT)作用，将β-N-乙酰葡糖胺以共价键方式结合于蛋白质的Ser/Thr残基上。这种糖基化主要于细胞质或胞核中。O-GlcNAc糖基化蛋白质的解离需要特异性的β-N-乙酰葡糖胺酶(O-GlcNAcase)作用，O-GlcNAc糖基化与去糖基化是个动态可逆的过程。 O-GlcNAc糖基化位点常位于蛋白质Ser/Thr磷酸化位点处或其邻近部位。糖基化后即会影响磷酸化的进行，反之亦然。 六、糖蛋白分子中聚糖影响蛋白质的半衰期、结构与功能糖蛋白分子中聚糖的功能：（一）聚糖可稳固多肽链的结构及延长半衰期 糖蛋白的聚糖通常存在于蛋白质表面环或转角的序列处，并突出于蛋白质的表面。有些糖链可能通过限制与它们连接的多肽链的构象自由度而起结构性作用。O-连接型聚糖常成簇地分布在蛋白质高度糖基化的区段上，有助于稳固多肽链的结构。一般来说，去除聚糖的糖蛋白，容易受蛋白酶水解，说明聚糖可保护肽链，延长半寿期。有些酶的活性依赖其聚糖，脂蛋白脂肪酶N-连接型聚糖的核心五糖为酶活性所必需。（二）聚糖参与糖蛋白新生肽链折叠或聚