SOP-WSW-409《抗酸染色检查标准操作规程》.pdf

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1. 抗酸染色原理: 结核菌、麻风杆菌等抗酸性菌,因其菌体表面有一层类脂或脂质的皮膜而不易着色,但 一经着色,盐酸酒精的作用也不容易脱色。利用此特性,以增强的染色液予以染色,然后再 用盐酸酒精加以处理,使其脱色后再对比染色,此时抗酸性菌仍是固定着最初的颜色(红色), 也就易于鉴别。 2. 试剂组合:(BASO抗酸染色液) 石碳酸复红;盐酸酒精溶液;亚甲基蓝溶液。 3.染色方法:(热染法) 3.1在已经固定的涂片上滴加石炭酸复红,使其盖满涂面,徐徐加温,使冒蒸汽,但不可沸 腾。染液因蒸发减少时,应随时添加,防止干枯,维持5分钟。 3.2待冷却后水洗干净。 3.3加盐酸酒精脱色,直到无红色脱落为止,约需2分钟,水洗干净。 3.4亚甲基兰复染0.5-1分钟,水洗,待干,镜检。 4.结果判定: 抗酸性细菌(结核菌)呈红色。 非抗酸性细菌及细胞呈蓝色。 5.注意事项: 5.1玻片应选择新而无纹路的,应经过95%乙醇脱脂方可使用。涂片厚度适中,涂片时注意 不要四溅。涂片迅速在空气中干燥或在35℃孵干,,通过火焰固定待冷。染色液盖没涂 片不可过多,以免溢出。 5.2水洗不可太急,阴干镜检,不用纸吸。镜检前加油时,不可触及标本,镜检后遇阳性, 用擦镜纸将镜头擦干净。 5.3染色镜检结果采用分级报告,阳性结果应由他人复验。 5.4所有抗酸染色镜片上的编号应与登记本上一致,至少保留三个月。 6.质量控制: 阴性菌对照:大肠杆菌

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