SOP-WSW-015《VITEK2-compact全自动微生物分析系统性能验证实验标准操作规程》.pdf

1．目的 针对湖南省肿瘤医院临床微生物室所用的Vitek2-Compact全自动细菌鉴定及药敏分析 仪对20种标准菌株或室间质评菌株的鉴定符合率，对4种药敏标准菌株药敏符合率的验证， 以确保所用仪器系统运行及试剂盒性能正常。 2．验证仪器 仪器名称： Vitek2-Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统。 仪器生产厂家：法国生物梅里埃生物有限公司。 试剂：鉴定试验用革兰阳性菌鉴定卡GP、革兰阴性菌鉴定卡GN，药敏实验用革兰阳性 菌药敏卡GP-AST67、革兰阴性菌药敏卡GN-AST13。 3．性能验证的检测时机 3.1方法/系统首次在实验室使用时 3.2EQA/PT结果未通过时，采取纠正措施后 3.3检测系统发生改变时 3.4检测系统发生重大故障时 3.5检测系统改变位置时 4.细菌选择 4.1微生物鉴定细菌选择（20种） 标准菌株：产酸克雷伯菌ATCC700324、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、 福氏志贺菌 ATCC12022、肺炎链球菌ATCC49619、铅黄肠球菌ATCC700327、粪肠球菌ATCC 29212、金黄色葡萄球菌ATCC29213、A群链球菌ATCC19615。 室间质评菌株：鲍曼不动杆菌、甲型副伤寒沙门菌、病牛沙门菌、宋内志贺菌、鲍氏志贺菌、 粪产碱杆菌、嗜水气单胞菌、产酸克雷伯菌、坂崎肠杆菌、屎肠球菌、表皮葡萄球菌。 4.2微生物药敏细菌选择（4种）： AST-GN13：大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853 AST-GP67：粪肠球菌ATCC29212、金黄色葡萄球菌ATCC29213 5．适用人员 经岗位授权的技术人员。按照检测系统的检测程序、质量控制程序和维护保养程序等进 行操作。 6．验证方案 6.1微生物鉴定 菌株种类的选择应参照厂商说明书革兰阳性和革兰阴性非苛养菌等。包括室间质评菌株 和标准/质控菌株。每种类型应至少1株，总体不少于20株。按厂家说明书或实验室检测程序 规定对验证菌株进行检测，一般要求鉴定至种水平。 6.2抗菌药物敏感性实验 参考CLSI细菌药敏试验操作及判断标准，选择药敏质控标准菌株和药物。采用替代质控 方案，即连续5天，每天对每一组药物/细菌重复测定3次，每次单独制备接种物，15个数据 中超出参考范围的结果应不超过（≤）1个，若失控结果为2-3个，则如前述，再进行5天， 每天3次重复试验，30个数据失控结果应不超过（≤）3个。 7.具体操作方法 7.1将验证菌株从冷冻冰箱中取出，平衡至室温，接种于血平板或特殊培养基，按培 养条件要求孵育18-24h。 7.2从平板上挑取单个菌落，进行传代培养1~2次。 7.3从传代的平板上挑取单个菌落，按不同检测卡的菌悬液浓度要求配置菌液。革兰 阳性球菌选择GP鉴定卡，革兰阴性杆菌选择GN鉴定卡，将卡片按顺序放在载卡架上， 输样管插入到菌液管中。自动阅读孵育仓内所有卡片，并将数据传入英文工作电脑， 电脑分析所有数据并给予结果，确认无误结果可传至中文电脑，由操作者认可审核。 7.4药敏实验：每天使用大肠埃希菌（ATCC25922），金黄色葡萄球菌（ATCC29213）， 肠球菌（ATCC29212）和铜绿假单胞菌（ATCC27853）质控菌株进行药敏质控监测， 连续监测5天，每次重复测定3次。 8．可接受标准 8.1微生物鉴定 标准/质控菌株符合率应为100%，室间质评菌株的符合率在90%以上。临床 菌株的鉴定值也应满足制造商要求（鉴定值85%，鉴定符合率90%）。若未能满足要求，则 该检测系统不能通过验证或制造商和/或使用者必须采取措施。修正后的检测系统应再次进 行验证。 8.2抗菌药物敏感性实验 标准菌株药敏试验结果符合质控要求和制造商要求(符合 率90%)，若未能满足要求，则该检测系统不能通过验证或制造商和/或使用者必须采取措施。 修正后的检测系统应再次进行验证。 9.相关记录 1、Vitek2-Compact全自动细菌鉴定及药敏分析仪性能验证方案及质控结果记录表 2、Vitek2-Compact全自动细菌鉴定及药敏分析仪性能验证报告