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细胞迁移和侵袭实验技术演示文稿 第一页，共三十页。 （优选）细胞迁移和侵袭实验技术 第二页，共三十页。 肿瘤细胞运动 常用研究方法 Text in here 侵袭实验 趋化运动 划痕实验 第三页，共三十页。 实验原理 细胞划痕法是测定了肿瘤细胞的运动特性的方法之一。在体外培养的单层细胞上，划痕致伤，然后在加入药物等实验条件下观察其对肿瘤细胞迁移的影响。 划痕实验（伤口愈合实验，Scratch Assay） 第四页，共三十页。 操作步骤 1．先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀的划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过3条线。 第五页，共三十页。 操作步骤 2. 在孔中加入约5×105个细胞，具体数量因细胞种类不同而不同，接种原则为过夜后融合率达到100%； 3.用10ml tip 枪头用力均匀地在培养皿中划痕，PBS 洗涤2 次，去除划下的细胞，加入无血清培养基。? ? 第六页，共三十页。 操作步骤 4．放入37℃?5%?CO2培养箱培养。每3h 测量一次细胞运动的距离，拍照(具体时间依实验需要而定)。 第七页，共三十页。 操作步骤 5. 数据处理：每个时间点的距离长度-0 时距离=每个时间长度细胞整体迁移的距离，求出均数和标准差，时间为横轴，迁移距离为纵轴（单位mm）作图，并比较初始0 时与实验