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NEB2040S说明书 ® Monarch RNACleanupKits NEB#T2030S/L,#T2040S/L,#T2050S/L10/100预处理 版本3.0_04/20 目录 绪论 2 规格 3 应用 3 与 NA合作的一般准则 6 缓冲液制备 7 MonarchRNACleanupKitProtocol .7 补充协议 8 ® TRIzol /氯仿提取后水相中RNA的纯化 8 将大、小RNA分离成馏分 9 从琼脂糖凝胶中提取RNA.10 RNA定量分析 11 故障处理12 选择信息13 修订的历史14 如何回收Monarch套件组件 14 套件组件 本试剂盒应在室温下储存。始终保持缓冲液瓶紧闭，并将柱子密封在所附的拉链袋中。有关缓冲液成分的信息安全数据表。应 采用适当的实验室安全做法，包括使用白大褂、手套和眼睛保护。 T2030s/T2040s/ T2030L/ T2050s10项准 T2040L/ 储存温度 备工作 T2050L100项准 备工作 君士坦丁堡RNA清理专栏 10列100列室温。 君士坦丁堡收藏管II 10个管子100个管子室温。 MonarchRNACleanup结合缓冲液 4毫升40毫升室温。 MonarchRNACleanup (5Concentrate) 2.5毫升 2x20毫升 室温。 无核酸酶的水 2.5毫升25毫升室温。 1 简介 Monarch NACleanupKit是一种快速和可靠的方法，用于清理和浓缩 高质量的 NA。从体外转录、 NA盖帽和 DNase处I 理 等酶促 反应中去除蛋白质、缓冲盐和核苷酸，可以用 最少的精力和时间轻松完成。Monarch NACleanupKit有 3种不同的结合能力。 10µg（NEB#T2030）、50µg（NEB#T2040）和 500µg（ NEB#T2050）。每个试剂盒都包含独特的色谱柱，所有的设计都是为了防 止缓冲液的滞留，确保没有污染物的携带， 从而实现 高纯度 N的A低容量洗脱（ T20：30 μ≥6，l T20：40 ≥μ2和0 l T20。50 ≥50µl）。按照标准方案，用该试剂盒纯化的 NA≥25nt；然而，有一个修改的方案可以使小至 15nt的 RNA（包括 miRN）A 被结 合 各种RNA纯化试剂盒使 用相同的 缓冲液（包括为了方便而使 用的 单一洗涤缓冲液）和类似的结合 /洗涤 /稀释协议 最少的 旋转和 孵化时间使 10µg和50µg容量的纯化时间少于5分钟，500µg容量的纯化时间为10-15分钟 MonarchRNACleanupBindingBuffer 和乙 醇（不提供） 用于稀释样品，并确保它们与专有的硅胶基 质结合 接下来， MonarchRNACleanupW ashBuffer确保酶、洗涤剂 和 其他低分子量的反应成分（如核 苷酸）被 去除 最后， RNA用无核酸酶的水洗脱 洗脱的 RNA是高纯度的，可 用于各种下游应 用，包括 RTPCR、用于 NGS的 RNA文库制备、转染、用于基因组编辑研究的核糖核蛋白（