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原位杂交组织化学的方法和常用试剂配制.docx

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    原位杂交组织化学的方法和常用试剂配制一、杂交前预备 〔一〕DEPC 水是经DEPC 处理过的灭菌蒸馏水。 DEPC 即二乙基焦碳酸酯〔diethylprocarbonate〕，可灭活各种蛋白质，是RNA 酶的强抑制剂。原位杂交在杂交及其以前的各步处理中，全部液体试剂都应经DEPC 处理。方法是：取市售DEPc 1ml，参与 1L 待处理水〔蒸馏水等〕中，经猛烈振摇后，于室温静止数小时，然后高压灭菌，以除去降解DEPC〔DEPC 分解为CO2 和乙醇〕。有些试剂可直接参与DEPC，终浓度一般为 0.1%～0.4%，原则上在杂交及其以前的步骤中，全部液体试剂均需用DEPC 处理，或用D

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