昆明医学院分子生物学实验的设计.pptxVIP

会计学;实验名称 高铁血红蛋白还原实验;实验原理;G6PD的缺陷不能提供足够的NADPH以维持还原型谷胱甘肽（GSH）的还原性（抗氧化作用），在遇到蚕豆中某种因子后更诱发了红细胞膜被氧化，红细胞膜上的磷脂分子中的不饱和脂肪酸氧化生成过氧化脂质，损害细胞膜。 G-6-PD有保护正常红细胞免遭氧化破坏的作用，新鲜蚕豆是很强的氧化剂，当G-6-PD缺乏时则红细胞被破坏而致病。 亚甲基蓝与血红蛋白结合能力强 亚硝酸钠能使血红蛋白变成高铁血红蛋白 高铁血红蛋白还原试验意义 当红细胞G-6-PD活性正常时，还原率75%；如G-6-PD缺陷，形成高铁血红蛋白，还原速度远较正常红细胞慢，还原率显著降低。 ;实验试剂;实验仪器;实验步骤;;经调整的全血/ml;4 颠倒混匀，以“B”管为空白管，在波长635 nm 处测定“A”管及“ S”管吸光度。 5 高铁血红蛋白还原率(MHb% )=(1一A／S)×100 ，MHb%在31～74 之间(中间值，杂合子)或≤30 (纯台子)，即为G 6PD活性缺乏，均判断为阳性。MHb% ≥75 ，则为G6PD活性正常，判断为阴性。;实验结果;思考题;相关知识;3.从生化代谢解释患儿的临床表现和实验室检查结果。（必答）;1，G6PD的缺陷不能提供足够的NADPH以维持还原型谷胱甘肽（GSH）的还原性（抗氧化作用），在遇到蚕豆中某种因子后更诱发了红细胞膜被氧化，红细胞膜上的磷脂分子中的不饱和脂肪酸氧化生成过氧化脂质，损害细胞膜发生溶血。 故临床表现为黄疸，精神萎靡，低热。溶血严重发生心力衰竭，造成食欲不振、恶心、呕吐 这些临床症状，心衰最典型的症状是程度不同的呼吸困难，所以病人呼吸急促。 ;2，还原型谷胱甘肽（GSH）是体内重要的抗氧化剂，可以保护一些含—SH(氢硫基)的蛋白质或酶免受氧化剂尤其是过氧化物的损害。因G6PD的缺陷不能提供足够的NADPH以维持还原型谷胱甘肽（GSH）的还原性（抗氧化作用），高铁血红蛋白还原成血红蛋白降低。 3，高铁血红蛋白还原率(MHb% )在31～74 之间(中间值，杂合子)或≤30 (纯台子)，即为G 6PD活性缺乏，均判断为阳性。MHb% ≥75 ，则为G6PD活性正常，判断为阴性。;;4.要想探讨该病发生的分子基础，可以用哪些技术检测什么目的基因？（选答）;5. 患者体型瘦小与该病症是否有关，为什么？（选答） ;谢谢观赏