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HCV血清分型方法的建立及其评价(临床医学论文资料)
文档信息
:
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目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:HCV血清分型方法的建立及其评价 2
1、研究材料 2
2、研究对象 2
3、研究方法 3
4、研究结果 3
5、研究结论 4
6、结语 5
文2:消痛贴膏微生物限度检查方法的建立 5
1 器材 5
2 方法 6
2.3 菌回收率测定 7
2.4 细菌、霉菌和酵母菌计数方法验证[1] 7
2.5 控制菌检查方法验证 8
3 结果 8
4 讨论 9
参考文摘引言: 9
原创性声明(模板) 10
正文
HCV血清分型方法的建立及其评价(临床医学论文资料)
文1:HCV血清分型方法的建立及其评价
肝炎病毒导致的各类肝炎具有较强的传染性,在我们日常生活中最为常见的肝炎病毒有乙肝、丙肝等。这些年来这类问题也受到了人们广泛的关注,有很多家长从小就带着自己的孩子进行乙肝疫苗的注射,很多学校也统一带领学生进行疫苗的注射工作,防止感染乙肝病毒。丙肝同样具有传染性,也同样给人们的健康带来巨大的威胁,该类病毒的一个传染途径就是血液的传播,如何保证输血的血液都是健康的呢?需要我们拥有一套完善的血清分型方法,进行血液的检测工作。
1、研究材料
丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的一种重要的世界性传染病。据统计全球已有1.7亿人受到感染,我国的丙肝感染率大约为3.2%,而多数HCV感染都是无症状性的,少数引起急性肝炎的患者,其症状也比甲型和乙型急性肝炎的症状轻。不幸的是,感染丙肝病毒后形成慢性感染的机率很高,且有相当比例患者会发展成肝硬化、肝癌。现代社会医患关系越来越紧张,因手术或输血造成的医疗纠纷频频发生,丙型肝炎的检测在输血前或术前检查中越来越受到重视。因此,对输血前或术前患者做丙肝病毒检测具有重要临床意义。所以,本研究的主要内容是寻找对含有丙型肝炎病毒即HCV的血清进行分型的有效方法,从而降低因输血而感染该类病毒的可能性,大大的提高了输血者的安全指数,降低了感染该类疾病的几率。
2、研究对象
本研究的研究对象为2014年9月至2015年9月在我院进行肝炎疾病治疗的患者共280例,其中选出的70例HCV1b和70例HCV2a患者血清,70例乙型肝炎患者血清,70例戊型肝炎患者血清,70例其他肝病患者血清,分别用试剂进行配型,对结果进行分析。
3、研究方法
本研究采用自制的试剂,从基因配型方面考虑,与其他的方法相比具有更高的准确性,检测结果也更为简单,下面我们来了解一下具体的试验方法。干扰素治疗丙型肝炎患者最有效的预测因素即为HCV基因型,但由于基因型方法技术要求高,操作复杂,限制了HCV基因分型方法的应用,因此我们采用含有HCV-cAg、4两个区段的特异性嵌合抗原结合竞争抑制酶联法,研制了更适合推广的血清分型检测试剂,并对该试剂进行了初步的敏感性及特异性评价。本试剂采用克隆表达的含有HCV-cAg、4两个区段的特异性嵌合抗原进行包被及中和。操作步骤如下:在包被1b、2a抗原的酶联板中交叉加入竞争抗原10μl,lb和2a抗原混合包被的孔中加入含1b和2a抗原的竞争液10μl,再加入80μl样品稀液,最后加入10μl待测血清,反复吹打混匀,37℃孵育3Omin,用洗涤液洗板5次拍干,加入辣根过氧化物酶标记的鼠抗人1gG(酶结合物)100μl,37℃孵育20min,洗板5次拍干。加TMB显色液:A和B液各50μl,37℃避光显色10min,加入终止液50μl,用酶标仪读取吸光值,判断样本血清。
4、研究结果
280例HCV患者血清抗体均为阳性,S/CO3.5。280例HCV患者中,检测型别特异性抗体216例,分型率为78.5%,与基因型符合率为98.09%。其中lb型56例,分型率为78.12%,55例与基因型一致,符合率为99.0%,2a型59例,分型率为79.17%,57例与基因型一致,符合率为96.49%。从最终的结果我们可以看出,该实验的结果具有较高的准确性,但是还需要得到进一步的提升,后期还要进行细节方面的调整,才能取得更好的结果。
5、研究结论
丙型肝炎病毒一种高度异质性单股正链的RNA病毒,可分为不同的基因型或亚型,国际上通常采用是simmonds基因分型法,将HCV基因型分为6个主要的基因型和11个亚型。常用的基因分型方法有基因型特异探针杂交法、PCR-RFLP基因分型法、型特异引物扩增HCV基因组特异区
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