组培实验室的构建.pptxVIP

会计学;第1页/共37页;组织培养实验室设计;（一）设计规模和原则 1.设计规模：取决于工作的目的。 以工厂化生产为目的…；以科研为目的…； 2.设计原则： 1）.保证无菌操作： 植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件，需要一定的环境、设备、器材和用具。 2）.工作方便：按组织培养程序来没计，避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。 3）.培养条件：人工控制温度、光照、湿度等。;（二）、组培实验室组成：;准备室;第6页/共37页;第7页/共37页;第8页/共37页;酸度计;第10页/共37页;第11页/共37页;立式高压自动灭菌锅; 主要任务：主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。 主要设备：紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针）等。;无菌操作室;超净工作台; 接种室宜小不宜大，一般7～8平米，要求地面、天花板及四壁尽可能密闭光滑，易于清洁和消毒。配置拉动门，以减少开关门时的空气扰动。 接种室要求干爽安静，清洁明亮。在适当位置吊装1～2盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。最好安装一小型空调，使室温可控，这样可使门窗紧闭，减少与外界空气对流。 接种室应设有缓冲间，面积1m2为宜。进入无菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入接种室杂菌。缓冲间最好也安一盏紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。 ; 培养室：是将接种的材料进行培养生长的场所。 大小：根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。其设计以充分利用空间和节省能源为原则。高度比培养架略高为宜，周围墙壁要求有绝热防火的性能。 ;主要设备：培养架（控温控光控湿）、摇床、培养箱、紫外光源等。培养材料放在由金属制成培养架上培养。 培养架一般设5层，最低一层离地高约lOcm，其他每层间隔30cm左右，培养架高1．7m左右。其长度根据日光灯长度而设计， 如采用40W日光灯，则长I．3m，30W的长lm，宽度一般为60cm。 培养室最重要的因子是温度，一般保持在20—27℃左右，具备产热装置，并安装窗式或立式空调机。 ;实验室培养架;实验室培养架;恒温摇床;第22页/共37页;由于热带植物和寒带植物等不同种类要求不同温度，最好不同种类有不同的培养室。室内湿度也要求恒定，相对湿度以保持在70%～80%为好，可安装加湿器。控制光照时间可安装定时开关钟，一般需要每天光照10-16h，也有的需要连续照明。 现代组培实验室大多设计为采用天然太阳光照作为主要能源，这样不但可以节省能源，而且组培苗接受太阳光生长良好，驯化易成活。在阴雨天可用灯光作补充。 ;细胞学实验室 该室用于对培养物的观察分析与培养物的计数等。主要设备：双筒实体显微镜、显微镜、倒置显微镜等。小型仪器设备有：分注器、血球计数器、移液枪、过滤灭菌器、电炉等加热器具、磁力搅拌器、低速台式离心机等。 ;显微镜 ;第二节 常用设备和器材 ;卧式灭菌锅;立式高压自动灭菌锅;二、净化工作台;超净工作台;三．接种工具：常用的有双筒实体显微镜、镊子、剪刀、解剖刀、酒精灯等。? 四．培养设备：常用的有空调机、定时器、温度控制器、增湿和去湿机、培养瓶、培养架、摇床或旋转床、日光灯、光照培养箱等。 五．化学实验及分析设备：天平、酸度计、蒸馏水器、烘箱、电炉、药品柜、冰箱、废污物桶等。 六．培养物细胞学观察设备：主要包括显微观察设备、组织切片染色用设备、照相冲洗设备。 七.微孔过滤器（细胞过滤器） ：激素用于灭菌。;附1：玻璃器皿的选择与清洗 ;二．玻璃器皿的清洗： 1．洗涤剂：肥皂、洗洁精、洗衣粉和铬酸洗涤剂。一般用洗衣粉即可。 2．新购置的玻璃器皿由于它们或多或少含有游离碱性物质，使用前先用1%稀盐酸内浸泡一夜，然后用肥皂水洗净，清水冲洗，最后用蒸馏水冲淋一便，干后备用。 3．对已被霉菌等杂菌污染的玻璃器皿则必须现在121℃高压蒸汽灭菌30分钟后再清洗。 4．洗净的玻璃器皿应透明发亮、内外壁水膜均匀，不挂水珠。 ;附2 、组培室的卫生与灭菌 ;3、无菌室和培养室的灭菌 （用甲醛和高锰酸钾熏蒸） （1）配方:每立方米空间用甲醛l0ml加高锰酸钾5g的配比液进行熏蒸。 （2）方法:首先房子要密封。然后在房子中间放一玻璃器皿，将称好的高锰酸钾放入玻璃器皿内，再把已称量的甲醛溶液慢慢倒入，完毕，人迅速离开，并关上门，密封3天 （3）3天后，开启房间，搬走玻璃器皿废液，搞好地面卫生 （4）在己经熏蒸的房间里，用70%酒精纱布擦洗培养架、玻璃台面及工作台 ;实验安排： 07生物（1）：双周星期二 、14-21：00 班长： 电话：