FOLIN酚试剂法测定蛋白质含量LOWRY基本法.pptxVIP

会计学;二 实验原理;㈡ 试剂乙（磷钼酸-磷钨酸混合液）受蛋白质中半胱氨酸、酪氨酸、色氨酸和组氨酸等作用，使钨酸、钼酸两者同时失去1个、2个或3个氧原子，还原成含有多种还原型的混合酸，并且有特殊的蓝色。 ;第3页/共12页;利用蓝色深浅与蛋白质浓度的关系，可制备标准曲线，测定样品中蛋白质含量。本法可测定的蛋白质含量为15-280?g/mL。;三 操作步骤㈠ 标准曲线制作;;2. 以各标准溶液浓度为横坐标，各管的光密度为纵坐标作图，得标准曲线。 标准曲线必须从零点开始出发，最好能成一直线。画好后，注明所用仪器的型号及编号、所用波长及测定方法、名称及制作日期。 ;㈡ 样品测定 取试管3支，分为测定管和空白管和标准管。测定管内加入1mL待测样品溶液（适当稀释至25-280?g/mL蛋白质）。操作步骤与制作标准曲线相同，见表7-3。 ;;四 结果与计算 根据光密度读数查得标准曲线，计算检测液内的蛋白质含量。进一步可根据检测溶液的稀释倍数及实际所要求的蛋白质浓度换算。本实验要求蛋白质含量浓度以g/L为单位，也可以与测定管同样操作的标准管按下式计算蛋白质含量。 ;测定管蛋白含量= ×标准管蛋白质含量