紫外可见光分光光度法培训课件.pptVIP

紫外可见光分光光度法;一、电磁辐射和电磁波谱; 高能辐射区 γ射线 能量最高，来源于核能级跃迁 χ射线 来自内层电子能级的跃迁 光学光谱区 紫外光 来自原子和分子外层电子能级的跃迁 可见光 红外光 来自分子振动和转动能级的跃迁 波谱区 微波 来自分子转动能级及电子自旋能级跃迁 无线电波 来自原子核自旋能级的跃迁;常见的电磁辐射与物质作用的术语：;二、光学分析法及其分类;2．非光谱法：利用物质与电磁辐射的相互作用测定 电磁辐射的反射、折射、干涉、衍射和偏振等基 本性质变化的分析方法 分类：折射法、旋光法、比浊法、χ射线衍射法; 原子光谱法：以测量气态原子或离子外层或内层电子能级跃迁所产生的原子光谱为基础的成分分析方法。;1．分子吸收光谱的产生——由能级间的跃迁引起;2．分子吸收光谱的分类： 分子内运动涉及三种跃迁能级，所需能量大小顺序 ;（三）发射光谱;三、光谱法仪器——分光光度计;第十章 紫外-可见光光度法;第一节 基本原理和概念;一、紫外-可见吸收光谱的电子跃迁类型;图示; 电子跃迁类型：;图示;注： 紫外光谱电子跃迁类型 ： n—π*跃迁 π—π*跃迁 饱和化合物无紫外吸收 电子跃迁类型与分子结构及存在基团有密切联系 根据分子结构→推测可能产生的电子跃迁类型； 根据吸收谱带波长和电子跃迁类型 →推测分子中可能存在的基团（分子结构鉴定）;二、相关的基本概念;图示;3．生色团（发色团）：能吸收紫外-可见光的基团 有机化合物：具有不饱和键和未成对电子的基团 具n 电子和π电子的基团 产生n→ π*跃迁和π→ π*跃迁 跃迁E较低 例： C＝C；C＝O；C＝N；—N＝N— ;5．红移和蓝移： 由于化合物结构变化（共轭、引入助色团取代基） 或采用不同溶剂后 吸收峰位置向长波方向的移动，叫红移（长移） 吸收峰位置向短波方向移动，叫蓝移（紫移，??移）;三、吸收带及其与分子结构关系; 3．B带：由π→ π*跃迁产生 芳香族化合物的主要特征吸收带 λmax =254nm，宽带，具有精细结构； εmax=200 极性溶剂中，或苯环连有取代基，其精细结构消失;图示;图示;四、影响吸收带的因素;2、 跨环效应;非极性 极性 ;溶剂效应;4、pH值的影响：影响物质存在型体，影响吸收波长;光的吸收基本定律-- Lambert-Beer定律;图1 光和物质发生作用示意图;透光率：透过光的强度与入射光强度之比。;一、朗伯-比尔定律;2.比尔定律;二、朗伯－比尔定律;4、吸光系数;吸光系数两种表示法： 1）摩尔吸光系数ε： 在一定λ下，C=1mol/L，L=1cm时的吸光度; 在同一波长下，各组分吸光度具有加和性。 应用：多组分测定的理论依据;假设一束平行单色光通过一个吸光物体 ;（一）、Lamber-Beer定律：吸收光谱法基本定律;取物体中一极薄层;讨论：;二、偏离Beer定律的因素;（一）化学因素;（二）光学因素 ;*;讨论： 入射光的谱带宽度严重影响吸光系数和吸收光谱形状 ;2．杂散光的影响： 杂散光是指从单色器分出的光不在入射光谱带宽度 范围内，与所选波长相距较远 杂散光来源：仪器本身缺陷；光学元件污染造成 杂散光可使吸收光谱变形;四、透光率的测量误差——ΔT;1）暗噪音——与检测器和放大电路不确切性有关 与光讯号无关;续前;光源;1．光源：;3．吸收池： 玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英——不吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致） 4．检测器：将光信号转变为电信号的装置;二、类型： ;2．双光束分光光度计： ;1. 波长的校正 紫外区 测绘苯蒸气的吸收光谱 可见光区 绘制镨钕玻璃的吸收光谱;第四节 定性和定量分析;一、定性分析;1．对比吸收光谱的