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基因编辑技术论文 1.1ZFNs 1.2TALENs 1.3 CRISPR/Cas9 1.4BE ZFNs、TALENs和CRISPR/Cas9技术都依赖于在靶位点诱导双链断裂进而激活DNA的NHEJ和HDR。NHEJ容易引起随机插入和缺失，造成移码突变，进而影响靶基因的功能；HDR尽管精确性高于NHEJ，但是其在细胞中的同源重组修复效率低，约为0.1%~5%。BE技术的出现有效地改善了以上问题。 镰状细胞病(sickle cell disease, SCD)是由于β-珠蛋白基因的第7 个密码子的单基因点突变造成的。Hoban 等利用ZFNs 特异性靶向于β-珠蛋白基因，并诱导CD34+造血干细胞和祖细胞中的DNA 被切割。当ZFNs 与整合酶缺陷型慢病毒载体或寡核苷酸供体一起传送进细胞时，有效地实现了β-珠蛋白基因座的基因矫正。Hoban 的研究为镰状型细胞性贫血的基因治疗提供了重要的方法路径。 3.1脱靶效应 3.2核酸酶的传递效率和安全性 CRISPR/Cas9技术除了面临脱靶问题，可能还面临染色体结构异常的问题。Kosicki等在Nature Biotechnology上报道了Cas9还可能在作用靶点附近导致大规模的DNA删除，在部分情况下，甚至引起复杂的DNA重排。研究人员通过长读长测序和大范围的PCR基因型鉴定发现在小鼠胚胎干细胞和人类造血祖系细胞内，可能出现数千DNA