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- 2023-01-15 发布于上海
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会计学;二. 实验原理
限制性内切酶是一类能识别并切割双链DNA分子中特定核苷酸序列的核酸内切酶。 ;限制性酶切反应体系的组成
1,DNA
2,缓冲液
提供限制性酶作用所需的离子浓度及种类;提供限制性酶作用所需的 pH值
3,限制性内切酶;限制性酶切图谱的分析;DNA分子量Marker;三. 实验方法
1.在0.5 ml 离心管中混和如下试剂():
DNA: 2 μl
10×酶切缓冲液: 2 μl
无菌水: 14 μl
HindIII: 1 μl
EcoRI 1 μl
2.37℃水浴 45 min
;2.在0.5 ml 离心管中混和如下试剂(20μl):
PUC19 2μl
10×酶切缓冲液: 2 μl
无菌水: 14 μl
HindIII: 1 μl
EcoRI 1 μl
2.37℃水浴 45 min
;3.取10μl反应液,1%琼脂糖凝胶电泳检测,同时以 ? DNA(EcoRI/HindIII)作为分子量Marker
4.记录实验结果:对照分子量Marker,记录所得片段的数量和大小,并分析? DNA有几个HindIII酶切位点
;;;
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