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三、转（外源基因导入细胞） （一）转化方法 1、大肠杆菌的质粒转化 2、酵母的质粒转化方法 （二）转化率 （三）转化率的用途 （四）转化率的影响因素 第六十二页，共九十六页。 1、大肠杆菌的质粒转化 （1）钙离子转化法 （2）电转化法 （3）大肠杆菌的?噬菌体转染 第六十三页，共九十六页。 （1）钙离子转化法 适用于革兰氏阴性菌（如大肠杆菌），利用钙离子与细菌细胞膜磷脂在低温下形成液晶结构，这一状态下的细胞称为感受态细胞。此时细胞经过热脉冲发生收缩作用，细胞膜出现间隙，此时质粒DNA可通过进入细胞。 第六十四页，共九十六页。 （2）电穿孔法 将待转化的质粒或DNA重组连接液加在电穿孔转化仪的样品池中，两极施加高压电场。在强大电场的作用下，细菌细胞壁和细胞膜产生缝隙，质粒或DNA重组分子便可进入细胞内。电穿孔转化法操作简单，而且几乎对所有含细胞壁结构的受体细胞均有效，但转化效率差别很大。 第六十五页，共九十六页。 第六十六页，共九十六页。 （3）大肠杆菌的?噬菌体转染 第六十七页，共九十六页。 2、 酵母的质粒转化方法 （1）乙酸锂转化法 （2）原生质体转化法 （3）电转化法 第六十八页，共九十六页。 8.末端 （脱氧核苷酸）转移酶(TdT) 作用 将标记或未标记的dNTP加到DNA的3’-OH末端；也可催