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研究生分子医学实验技能实验二 中山医学院 分子医学实用技术 蔡卫斌 生 物 化 学 教 研 室 ?4 ? 生物化学与分子生物学教研室 生化与分子生物学技术 操作流程 琼脂糖凝胶板的制备 质粒DNA及酶切产物电泳（约1h） （10 μl）酶切操作、保温（1-3h） 质粒DNA提取原理与方法、实验操作 纯化的质粒DNA（20μl） 琼脂糖凝胶电泳结果观察 结果分析与问题讨论 9月23日 9月30日 DNA的紫外分光光度法定量测定 实验三：DNA的琼脂糖凝胶电泳 实验四：DNA的紫外分光光度法定量测定 实验三 DNA的琼脂糖凝胶电泳 琼脂糖凝胶电泳法 凝胶电泳是分离和纯化DNA片段最常用的技术。根据制备凝胶的材料: 琼脂糖电泳 凝胶 电泳 聚丙烯酰胺电泳 一、琼脂糖凝胶电泳的功用 琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的标准方法。该技术操作简便快速，可以分辨用其它方法（如密度梯度离心法）所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶(Ethidium bromide, EB)染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外,还可以从电泳后的凝胶中回收特定的DNA条带,用于以后的克隆操作。 二、实验原理： 在 pH