研究生第八讲.pptx

3 抗生素的分类（根据结构分类） 3.1 β-内酰胺类抗生素—主要有青霉素类、头孢霉素类 3.2 氨基糖苷(环醇）类抗生素—主要有链霉素、卡那霉素、庆大霉素等。 3.3 四环类抗生素—主要有四环素、土霉素、金霉素、多西环素（强力霉素）等;3.4 大环内酯类抗生素—主要有红霉素、螺旋霉素等 3.5 蒽环类抗生素—主要有阿霉素、紫红霉素等； 3.6 安莎霉素类抗生素—主要有力复霉素、力复平等 3.7 多烯大环内酯类抗生素—主要有两性霉素B、制霉菌 素、杀假丝菌素等 3.8 聚醚类抗生素—主要有莫能霉素、盐霉素等； 3.9 肽类抗生素—多粘菌素、杆菌肽等； 3.10 放线菌类抗生素：放线菌素D（更生霉素） ;第二节 青霉素生产工艺 1 青霉素的结构与抑菌机理 青霉素和头孢霉素是β-内酰胺类抗生素的主要代表， β-内酰胺类抗生素是迄今为止已知抗生素中毒性最低、 品种最多、临床上应用最广泛的一类抗生素。这类抗 生素由一个四元β-内酰胺环和一个五元或六元的杂环通 过N和相邻的C原子结合而成。 ; 6-酰胺-2，2-二甲基青核-3-羧酸; 青霉素的化学名：6-酰胺-2，2-二甲基青核-3-羧酸，俗名 ：盘尼西林。 β-内酰胺类抗生素的抑菌机理是：干扰细胞壁(肽聚糖)的合 成。通过与转肽酶的作用，特异性地抑制细菌细胞壁肽聚糖 的完整合成，并且只作用于生长中的细胞，对静止的细胞无效。 对无细胞壁的动物不产生毒性。但是，这类化合物易和血浆 蛋白结合，形成过敏。此外， β-内酰胺类抗生素长期使用细菌易产生抗药性。 ;2 青霉素的合成机制： 青霉素、头孢霉素C合成的前体物质有半胱氨酸（cys)、缬氨酸(val)、α-氨基己二酸及苯乙酸等。 3个前体氨基酸由葡萄糖转化而成，首先在三肽合成酶 （ACVS ）的作用下，将它们缩合成三肽（LLD-ACV）， 然后由异青霉素N合成酶（IPNS）催化LLD-ACV氧化闭 环（环化），生成异青霉素N（IPN），再与活化的侧链 前体苯乙酰CoA或苯氧乙酰CoA将IPN转化成青霉素G或 青霉素V（转酰基）。 ;;3 青霉素生产工??? 3.1 青霉素生产菌种：经选育后的产黄青霉菌株。 3.2 孢子制备：为了获得丰富的高质量的孢子。 产黄青霉 活化 斜面母瓶 25 ℃，6~7d 大米/小米孢子培养基 （休眠孢子） 接种 25 ℃，6~7d 米孢子 3.3 种子制备：目的是使孢子发芽、繁殖以获得足够的菌丝。 米孢子 一级种子罐 25 ℃，1：2 V/V 二级种子罐 40~45h 接种10% 25 ℃，1：1.5 V/V 发酵罐 16 ~18h 接种20% ;3.4 培养基： 3.4.1 母斜面培养基：葡萄糖、蛋白胨、甘油； 3.4.2 孢子培养基：大米/小米 3.4.3 一级种子罐 ：葡萄糖、乳糖、玉米浆； 3.4.4 二级种子罐：葡萄糖、玉米浆 3.4.5 发酵培养基：碳源：葡萄糖；氮源：玉米浆、花生饼粉、棉籽饼粉、硫酸铵、尿素；前体：苯乙酸或苯乙酸铵（分多次加入）；无机盐：包括S、P、Ca、Mg、K等，Fe3+应严格地控制在30μg/ml以下。 ;3.5 发酵培养 3.5.1 温度控制：前期（60h前）25 ℃ ~26 ℃，中期（60h后）23 ℃，后期适当升温。 3.5.2 pH控制：通过流加葡萄糖控制6.4 ~6.6，避免达到7.2，一般残糖降至0.6%左右、pH上升时开始加糖。 3.5.3 溶氧控制：通气比一般为1：0.8，溶氧不低于饱和溶氧的30% 3.5.4 补料：流加葡萄糖、硫酸铵、氨水、苯乙酸或苯氧乙酸、消泡剂(通常用豆油、玉米油或化学合成消泡剂） 3.5.5 周期：180h~240h ;第11页/共57页; 典型青霉素发酵过程曲线 PVC-湿细胞体积 PenG- 效价 DO- 溶氧浓度 Cs-残糖 Cn-氨基氮浓度 ;3.6 青霉素下游提取工艺 3.6.1 发酵液的预处理：发酵液冷却到5 ℃左右，加絮凝剂絮凝，搅拌均匀。青霉素对酸、碱、热都不稳定，因此，要在低温环境下操作。 3.6.2 发酵液的固液分离：采用鼓式真空过滤器进行固液分离。 3.6.3 溶媒（BA）萃取：滤液用