植物生理学实验.pptxVIP

实验6-1 脯氨酸含量的测定一、目的二、原理 当用磺基水杨酸提取植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中。加入酸性茚三酮加热处理后，溶液即成红色，再用甲苯处理，则色素全部转移至甲苯中，色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。在520 nm 波长下比色，用回归方程计算出脯氨酸含量。 第一页，共十七页。三、材料、仪器设备及试剂1、材料 常温和40℃处理的水稻幼苗。2、仪器设备 722型分光光度计、大试管、带塞刻度试管、移液管。3、试剂 2.5%酸性茚三酮溶液、3%磺基水杨酸、冰醋酸、甲苯。第二页，共十七页。实验流程各吸取2 mL各吸取2 mL冷却水稻幼苗分别称取0.5 gAA、常温处理5 mL处理30 min3%磺基水杨酸B、40℃处理BA酸性茚三酮冰醋酸 吸取上清2 mLB沸水浴10 min后，冷却。A520加4ml甲苯再次煮沸30min第三页，共十七页。四、实验步骤1、脯氨酸含量的回归方程： A520 = 0.021X－0.028 ( X：Pro含量 ， μg )2、准确称取不同处理的水稻幼苗（室温和 40℃处理30 min）叶片各0.5 g，分别置于大试管中。然后，分别加入3%磺基水杨酸溶液5 mL，在沸水浴中提取10 min（注意：提取过程中需经常摇动），冷却。第四页，共十七页。3、用移液管吸取2 mL提取液于另一干净的带塞刻度试管中，分别加入2 mL冰醋