生物化学第十章核酸的酶促降解和核苷酸代谢.pptxVIP

第十一章 核酸的酶促降解和核苷酸代谢第一页，共三十六页。第一节 核酸的酶促降解第二节 核苷酸的分解代谢第三节 核苷酸的生物合成第二页，共三十六页。 核酸酶 核苷酸酶 核苷酸磷酸化酶 核酸 核苷酸 核苷 碱基+戊糖磷酸第一节 核酸的酶促降解第三页，共三十六页。一、核 酸 酶核酸酶：生物体内存在的水解核酸磷酸二酯键的酶类，统 称核酸酶1、核酸酶的分类核糖核酸酶(RNase)脱氧核糖核酸酶(DNase)（1）根据对底物的 专一性分为非特异性核酸酶核酸内切酶核酸外切酶（2）根据切割位点分为2、核酸酶的作用特点第四页，共三十六页。 p p p p p p p p外切核酸酶对核酸的水解位点BBBBBBBB5′OH3′牛脾磷酸二酯酶（ 5′端外切5得3）蛇毒磷酸二酯酶（ 3′端外切3得5）第五页，共三十六页。内切核酸酶水解位点Pu ：嘌呤 Py：嘧啶 其专一作用于RNA，对DNA及其它磷酸二酯化合物不作用或作用活性很低。第六页，共三十六页。GAPyPuPyPyGACU1′OH3′5′ p p p p p p p p p p内切核酸酶对RNA的水解位点示意图RNAase T1RNAase IRNAase IRNAase T1专一水解鸟甘酸二酯键Pu ：嘌呤 Py：嘧啶 第七页，共三十六页。3.限制性内切酶 一类能识别一定序列并水解外源双链DNA的内切核酸酶．其特点是具有极高的专一性，能识别DNA双链上的特定位点，称为限制性内切酶，也称限制酶。甲基化酶：细菌除具有限制酶外，还具有一种对自身DNA起修饰作用的甲基化酶。 限制酶和其相应的修饰酶对底物DNA的识别和作用的部位是相同的。第八页，共三十六页。酶辨认的序列和切口说明Alu I‥ ‥A G C T ‥‥‥ ‥T C G A ‥ ‥四核苷酸，平端切口Bam H I六核苷酸，粘端切口‥ ‥G G A T C C ‥‥‥ ‥C C T A G G ‥‥六核苷酸，粘端切口Bgl I‥ ‥A G A T C T ‥‥‥ ‥T C T A G A ‥‥Eco R I六核苷酸，粘端切口‥ ‥G A A T T C ‥‥‥ ‥C T T A A G ‥‥Hind Ⅲ六核苷酸，粘端切口‥ ‥A A G C T T‥‥‥ ‥T T C G A A ‥‥六核苷酸，粘端切口Sal I‥ ‥G T C G A C ‥‥‥ ‥C A G C T G ‥‥Sma I六核苷酸，平端切口‥ ‥C C C G G G ‥‥‥ ‥G G G C C C ‥‥第九页，共三十六页。常用的DNA限制性内切酶的专一性限制性内切酶的命名和意义例：Eco R I，这是从大肠杆菌（Ecoli）R菌珠中分离出的一种限制性内切酶Eco R I属名种名株名序号 限制性内切酶是分析染色体结构、制作DNA限制图谱、进行DNA序列测定和基因分离、基因体外重组等研究中不可缺少的工具，是一把天赐的神刀，用来解剖纤细的DNA分子。第十页，共三十六页。 核苷酸酶 核苷酸磷酸化酶核苷酸 核苷 碱基+（脱氧）戊糖磷酸第二节 核苷酸的分解代谢一、核苷酸的降解第十一页，共三十六页。GRNH2尿酸（醇式）次黄嘌呤 黄嘌呤 NH3 + CO2尿素（微生物）二、嘌呤的降解第十二页，共三十六页。NH2还原二氢尿嘧啶H2O（开环）H2Oβ－丙氨酸β－脲基丙酸三、嘧啶的降解第十三页，共三十六页。第三节 核苷酸的生物合成一、核糖核苷酸的合成从头合成：是指利用磷酸核糖、氨基酸、一碳单位及二氧化碳等简单物质为原料，经过一系列酶促反应，合成嘧啶核苷酸的途径。 补救途径：是利用核酸降解或进食等从外界补充的含氮碱基或核苷合成新的核苷酸。第十四页，共三十六页。来自CO2C6来自天冬氨酸来自甘氨酸N7N1C5来自甲酸C8来自甲酸C2C4N9N3来自谷氨酰胺的酰胺氮1.嘌呤核苷酸的生物合成（1）嘌呤环上各原子的来源第十五页，共三十六页。(2). IMP的合成过程① 磷酸核糖酰胺转移酶② GAR合成酶③ 转甲酰基酶④ FGAM合成酶⑤ AIR合成酶第十六页，共三十六页。（CATR）第十七页，共三十六页。IMP生成总反应过程第十八页，共三十六页。AMP和GMP的生成①腺苷酸代琥珀酸合成酶 ③IMP脱氢酶②腺苷酸代琥珀酸裂解酶 ④GMP合成酶第十九页，共三十六页。嘌呤核苷酸从头合成特点? 嘌呤核苷酸是在磷酸核糖分子上逐步合成的。? IMP的合成需5个ATP，6个高能磷酸键。