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- 2023-03-15 发布于陕西
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质粒的提取及琼脂糖凝胶电泳实验报告
一、实验目的
本实验旨在提取麦芽中的染色体质粒,并利用琼脂糖凝胶电泳实验观察和比较其电泳图谱。
二、实验原理
染色体质粒中的DNA片段具有相对定向,当经过聚丙烯醇凝胶法提取抗原,随后在水溶液中经过动力学内切酶分解成片段后,可在特定的条件下经过琼脂糖凝胶电泳检测,从而比较不同的染色体片段的序列、形态和数量的异同。
三、实验方法
(1)实验器材准备
抗原提取试剂,抗原酶分解液,凝胶试剂,凝胶电泳室,质粒DNA的标准溶液,及相关仪器设备。
(2)实验步骤
1. 选取麦芽样品,将其加入抗原提取试剂,在机械搅拌器的作用下进行搅拌,随后采用离心管使抗原抽提出来。
2. 将抗原酶添加抽提后的抗原溶液中,并加入凝胶试剂,经混匀后放入凝胶电泳室,将质粒DNA标准溶液放入0.5、1、2、4、8号槽位中,开启电泳,并将质粒DNA标准溶液在琼脂糖凝胶上移动,直至质粒DNA完全移动完毕。
3. 关闭凝胶电泳室,静置1小时以上,等待凝胶固化。
4. 打开凝胶电泳室,用摄像仪对其进行拍照得到琼脂糖凝胶的电泳图谱,并记录峰面积、峰高和最高效度航程等指标。
四、实验结果
琼脂糖凝胶电泳图谱如下图所示:


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