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细胞生物学实验 细胞生物学实验篇一:细胞生物学实验指导 《细胞生物学实验》指导 一、实验课名称:细胞生物学实验Experiment of Cell Biology 二、实验课性质:独立设课 三、适用专业:生物技术和水产养殖 四、采用教材及参考书: 教 材:安利国主编(细胞生物学实验教程(北京:科学出版社，2004 参考书:1. 杨汉民主编(细胞生物学实验(第二版)(北京:高等教育出版社，1997.7 2. 徐承水，党本元主编(现代细胞生物学技术(青岛:青岛海洋大学出版社，1995 3. 王金发主编(细胞生物学实验教程(北京:科学出版社，2003 五、学时学分:课程总学时:36; 课程总学分:1 七、实验课考核方式: 1.实验课考核成绩确定:本课程考核成绩由平时成绩(占30%)、实验报告成绩(占30%)和终期考核成绩(占40%)三部分构成。 2.平时成绩确定:由任课教师根据实验操作、问题回答和出勤情 况确定，按A(优)、B(良)、C(及格)、D(不及格)四个等级评分。 3.实验报告成绩:本课程要求学生实验报告应包括以下内容:?实验目的及(转 载 于:wWw.HnnsCY.cOM :细胞生物学实验)原理:简明;?方法与步骤:具体操作步骤、注意事项等;?结果:详细每一步的结果以及计算方法和计算结果;?分析与讨论:根据所学知识对结果进行分析讨论，阐明所得结果说明了什么问题;如果结果与理论不符，应说明可能的原因。实验报告成绩由任课教师根据学生实验报告写作是否符合规范要求、试验结果及分析的具体情况给出。每次报告均按A(优)、B(良)、C(及格)、D(不及格)四个等级评分，实验报告成绩为各次报告成绩的平均值。 4.终期考核成绩:实验课结束后进行笔试、口试或现场操作考核，按A(优)、B(良)、C(及格)、D(不及格)四个等级评分。 实验项目 实验一、显微镜的技术参数及特殊光镜的演示实验 一、要求:了解普通光镜及各种特殊光镜的构造、成像原理及应用;掌握正确的使用方法;理解显微镜的技术参数和特殊光镜的结构特点;掌握实验报告的写法。 二、实验内容: 普通光学显微镜的结构及技术参数:由光学和机械两大系统构成。 1、光学系统及成像原理: (1)光学系统的构成:物镜、目镜、聚光器、光源部件等 (2)成像原理:根据透镜成像的原理，对微小物体进行放大(二次成像)。当被检物体放在物镜前方的1,2倍焦距之间，光线通过物镜在镜筒中形成一个倒立的放大实像，这个实像恰好位于目镜的焦平面之内，通过目镜后形成一个放大的倒立虚像。通过调焦装置使A2B2落在人眼睛的明视距离(25mm)处，使眼睛看到的物体最清晰。 2、机械系统:(从下往上) (1)镜座,位于最底部，是整台显微镜的基座，用于支持和稳定镜体。有的在镜座内装有照明光源; (2)载物台,也称镜台，位于物镜转换器下方的方形平台，用于放置被观察的玻片标本。中央有圆形的通光孔，来自下方的光线经此折射到标本上。 (3)镜臂,支持镜筒和镜台的弯曲状结构，是取用显微镜时握持的部位。 (4)调焦螺旋,调节焦距的装置，可使载物台升降，调好焦距，使物像呈现在视野中。 (5)物镜转换器,装载不同放大倍数的物镜。转动旋转盘可使不同物镜达到工作位置(与光路合轴)，使用时注意凭手感使所需物镜准确到位。 (6)镜筒,上端装有目镜，下端与物镜转换器相连物镜转换器。 3、显微镜的技术参数: (1)分辨率(resolution):指在25CM的明视距离处能区分开被检物体上两个相近质点的最小距离(显微镜能将邻近的两个质点分辨清楚的能力)。 R=0.61λ/N.A =0.61λ/n?sin(α/2) λ-照明光线波长; N.A,物镜的数值孔径;n为介质的折射率;α为镜口角。 思考:如何提高显微镜的分辨能力, 通常2θ最大值可达140?，θ角最大为70， Sin70?=0.94;λ一般0.45μm(蓝色光)，由公式可知当λ和Sin值均不变时，介质折射率n越大，能区分的二点之间的距离就越短，物镜的分辩率越好。 n=1(空气中)，分辨率R=0.29um; n=1.52(油镜下)R,0.19um，油镜下分辨率更好。R=0.2um 光镜的分辨极限 (2)放大率:放大倍数。M=Mob×Moc = ?/f1×250/f2Mob,物镜放大倍数;Moc,目镜放大倍数;?,光学筒长(单位:mm); f1,物镜焦距(mm);250,明视距离(mm);f2,目镜焦距(mm). 物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的，镜筒长度的变化不仅导致放大率的变化，而且成像质量也受到影响。因此，显微镜的镜筒长度是一定的。适宜的总放大率是所用物镜数值孔径的500,1000倍，在此范围内称为有效放大倍数。 (3)清晰度