生物技术第四讲植物组织培养的理论基础.pptxVIP

第四讲??? 植物组织培养的 理论基础?;;一、细胞全能性的概念 任何具有完整的细胞核的植物细胞，都拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息，即细胞具有全能性。 ; 细胞全能性概念随着实践的发展逐步完善。 1934年，White首次定义为: 每个植物活细胞在合适的条件下，都有发育为胚的能力。 20世纪70年代，扩大了以上定义范围，为：植物活细胞不但能形成胚状体，而且能发育为完整植株。 ; 目前细胞全能性定义为：每个植物活细胞都具有该物种的新陈代谢、应激性和自体复制等生命基本属性，在合适的离体培养条件下，可以展现这些特征属性。; 应激性：是指生物体随环境变化的刺激而发生相应反应的特征。 生物体的生存离不开环境条件，而环境又是不断变化的。除四季有规律的变化外，还有些急剧变化，如干旱、涝灾、高温、低温、昆虫侵害等等。;; 自我复制： 是指生物体利用自身作模板，通过代谢作用，复制出完全相同的结构，或产生也具有相同的自体繁殖能力的突变结构。 前者为“遗传”，后者为“变异”。 “遗传”保证了物种的纯化，“变异”为物种的进化提供依据。 自我复制实现了遗传与变异的矛盾统一。; 自我复制方式因繁殖方式不同而不同。无性繁殖植物通过体细胞分裂即可实现自我复制。; 有性繁殖植物自我复制必须通过配子体世代和孢子体世代，即：  受精卵———→ 组织分化、器官形成 —→ 性成熟 ————→ 配子 —→合子（受精卵）; 二、离体培养细胞展现该物种的生 命特性?;（一）培养细胞的新陈代谢 在适宜条件下，离体细胞能够存活，则具有新陈代谢特性。如：绿色细胞具有光自养能力；固氮植物细胞具有固氮特性；培养细胞具有该物种的“药物生物合成的能力” 。;（二）应激性 在适宜培养条件下，离体细胞具有应激性，表现在： 非绿色细胞应变出对培???和环境的对应方式，以异养方式生存并发展。依靠培养基供给营养来生存。 植物组织切割损伤后，应激于培养条件而出现脱分化，并在适宜的条件下再分化（芽和根）。;（三）培养细胞展现自体复制特性? 脱分化 植物组织――→ 愈伤组织 （脱分化细胞） 再分化—―→ 植株 ;;;; 脱分化 细胞、原生质体――→  再分化愈伤组织 —―→ 植株;; 细胞分裂 原生质体融合――→愈伤组织 再分化―→ 植株;;以上实例证明： 细胞分裂以及植株再生展现了培养细胞自体复制的特征属性。;;一、外植体脱分化 如茎段、根段、叶柄段、叶片、花药、花粉、幼胚等。;（一）诱导期间的细胞生物学变化 植物组织从母体上切割下来后，会发生一系列细胞学及生物化学方面的变化。 1）细胞结构变化：细胞核形状及外表变化，染色体的凝集，线粒体外形及数量改变等等。 2）代谢及生化变化：气体交换率增加，核糖体出现，有关酶的增加等。;（二）与脱分化有关的因子及其作用 任何具有完整的细胞核的植物细胞，都拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息，即细胞具有全能性。这种植物所具有的全能性只是一种可能性。;;⑴离体损伤刺激 要使植物组织或细胞经脱分化再生植株，必须从植物体其余部分的抑制性影响下解脱出来，即处于离体条件 (正常植株叶片上不会再长植株或愈伤组织)。离体损伤刺激是细胞脱分化的重要条件之一。 损伤刺激会使细胞呼吸速度增大，称为“损伤呼吸”，酶的活性增加，代谢物含量变化。;⑵生长物质的影响 细胞离体后，以异养方式生存，所以必须给与营养物质（培养基）。另外，还必须给与激素刺激，以打破抑制力，恢复细胞分裂。 抑制假说：认为静止细胞仍然保存着在分生组织状态时的那种细胞分裂潜能，只不过存在一种抑制物质或抑制力，使细胞分裂能力不能表现。如果去除这种抑制，细胞就恢复到分裂状态。; 这种抑制剂的作用原理及作用位点尚不清楚，但其抑制效能可能会在生长调节物质（激素）的作用下而失掉，从