实验二牛血清白蛋白的提取与鉴定.docxVIP

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实验二牛血清白蛋白的提取与鉴定 牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,简称BSA)是一种重要的理化指标,常用来对牛血清品质进行评估。由于BSA具有生长促进因子、血液凝固因子和病毒抑制因子等生物学功能,在临床上广泛应用。因此,正确和鉴定BSA具有重要意义。本文介绍了实验二牛血清白蛋白的提取和鉴定过程。 牛血清白蛋白的提取,遵循的是收集新鲜牛血清到室温下,用对称醋酸0.1mol/L来稀释,稀释到1∶1 ,然后再加入助凝剂4g/L,在4℃冷藏24h,放室温缓冲液,依次冲洗冷凝液层,把血液分离,最终收集冷凝液层,而该冷凝液层即为高纯度的BSA悬液。 牛血清白蛋白的鉴定,采用的是凝胶电泳-SDS,先将提取的高纯度BSA悬液进行离心,去除细胞残渣,提取出纯BSA,然后加入环糊精和异烟酸,煮沸5min,促使离子消除疏水性互相作用,改变蛋白的构形,利用多肽链被水解成亚稳态,增强蛋白电泳移动,分离出各种原始蛋白质,它们以分子量从低到高以带形状分布在凝胶中,最终染色,观察湿敷出的特征条带,结果表明所检出的BSA为单一条带,表明该BSA的鉴定结果正确。 实验二牛血清白蛋白的提取与鉴定的过程,通过对其特殊处理,高纯度、高质量的BSA可以从血清中获得。经过充分鉴定,该BSA可以用于免疫胶体金法印迹,检测,定量研究等实验,有时也可以作为医学检测的试剂,为生命科学的发展奠定坚实的基础。

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