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石蜡切片免疫荧光实验步骤
1、脱蜡至水:将组织切片室温放置10min后,依次将石蜡切片放
入二甲苯3min→无水乙醇5min—85%酒精5min—75%酒精
5min—ddH
2
O洗5min。
2、抗原修复:组织切片置于盛满柠檬酸抗原修复液(50X稀释至
1X使用)的修复盒中于微波炉内进行抗原修复(中火8min—停火
8min—中低火7min)。此过程中应防止缓冲液过度蒸发,切勿干
片。自然冷却后将玻片置于PBS中在脱色摇床上晃动洗涤3次,
每次5min(具体修复液和修复条件根据组织来确定)。
3、画阻水圈:切片稍甩干后用组化笔在组织周围画圈,防止液体
流失。
4、BSA封闭:在圈内滴加3%
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