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荧光定量PCR 之绝对定量分析——标准曲线得绘制
1 。 绝对定量定义
绝对定量就是用已知浓度得标准品绘制标准曲线来推算未知样品得量。 将标准品稀释至不同浓度,作为模板进行 PCR 反应。以标准品拷贝
数得对数值为横坐标, 以测得得 CT 值为纵坐标,绘制标准曲线,对未知样品进行定 量时,根据未知样品得 CT 值, 即可在标准曲线中得到样品得拷贝数。
＊ Log(起始浓度)与循环数呈线性关系,通过已知起始拷贝数得标准品可作出 标准曲线, 即得到该扩增反应存在得线性关系
* 由样品CT 值,就可以计算出样品中所含得模板量
2、 绝对定量标准品
标准品得一些标准
＊ 必须用与扩增目得基因
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