简述培养基配制的一般程序.docxVIP

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简述培养基配制的一般程序 培养基配制是生物、微生物领域较重要的实验技术,它能为酵母、细菌和其他寄主生物提供可持续的生长环境,能有效地改善和促进宿主的生长及产生活性物质。通常培养基配制步骤包括组分选择与重量确定、准备混合溶液、消毒和过滤等。 1.组分的选择和重量确定:选择恰当的材料,确定合适的重量比例,量出各种成分,按设定比例混合。 如氮源、脂肪酸、磷酸盐,重量比例根据不同细菌的需求来定,比如制备大肠杆菌的培养基重量比例约为: 磷酸盐7.5g/L、氮源20g/L。 2.准备混合溶液:将确定重量的成分放入容器中,加入适量的水,磅秤称重加入缓冲剂,然后用转子搅拌或搅拌到均匀,再做一次称重,确保按预定比例添加,以防止细菌培养过程中无营养成分或毒性物质的发生。 3.消毒处理:承德消毒处理,接下来要灭菌处理培养基,首先以75℃温度进行水浴灭菌,使培养基温度达到85℃,在水浴中维持30-45分钟,中间应搅拌均匀。然后,冷却到培养基的传统使用温度,并均匀搅拌培养基,以确保培养基内的温度均匀。 4.过滤处理:为了减少外源污染物和悬浮物,将培养基经过灭菌操作后,需进行一次筛选或滤过程,以保证培养基的洁净度。可以采用滤纸过滤,或用塑料过滤器筛选,也可以将液态培养基经过超声波分散或壁渠分散,再视野显微镜分散后过滤,以确保培养基中无悬浮微粒,用于生物实验。 5.存储及运输:标准的培养基配制操作完毕后,试剂和培养基应存放在密封的容器内,防止受湿和污染,并且要按照准则进行运输和使用,确保试剂和培养基高质量。 培养基配制是实验室中必不可少的技术,良好的实验设计需要有条件的技术作为根基,整个配制过程要求顺利,操作技术要正确,各个环节是分不开的,每个实验步骤及细节都需要慢慢理解掌握,只有精心的操作,才能保证高品质的培养基配制,为实验的顺利使用奠定坚实的基础。

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