畜牧渔业论文7篇：线鳞型黄金鲫（框鳞镜鲤♀×红鲫♂）mtDNA及同工酶的遗传分析 .docVIP

畜牧渔业　7篇 内容提要： ? 线鳞型　鲫（框鳞镜鲤♀×红鲫♂）mtDNA及同工酶的遗传分析 ? 从固定液保存的刺参样品中提取基因组DNA的改进方法 ? 牛片形吸虫病的流行、诊断与治疗 ? 春季猪呼吸道疾病的发生原因与防治 ? 奶牛化脓性放线菌性　炎的中西医治疗方法 ? 猪传染性胃肠炎的流行及诊治 ? 养殖业中磺胺类药物残留的危害及现状 全文共16515 字 线鳞型　鲫（框鳞镜鲤♀×红鲫♂）mtDNA及同工酶的遗传分析 【摘 要】对全鳞型　鲫和线鳞型　鲫的mtDNA D-loop及其邻近区段进行PCR扩增并测序，并检测了两种类型　鲫肌肉的GPI和LDH同工酶。1尾　鲫（全鳞型）获得了碱基排列顺序清晰的1348 bp的片段，2尾　鲫（全鳞型）尾为1351 bp，3尾　鲫（均为线鳞型）为1349 bp。应用MEGA6.0软件与GenBank上的3个鲤鱼（KC292935、KC292936和X61010.1）和3个鲫鱼（KC292946、KC292947和KC292948）相应区段比较结果表明，6尾　鲫与鲤鱼和鲫鱼的遗传距分别为0.011和0.095，鲤鱼与鲫鱼的遗传距为0.097。GPI与LDH两种同工酶谱显示两种类型　鲫均具有来自鲤鲫双方的遗传物质。结果表明，全鳞型与线鳞型　鲫均符合母本为鲤鱼、父本为鲫鱼的遗传特征，推测线鳞型　鲫母本鳞被的基因型应为SSNn、SsNn或ssNn，父本应为SSnn，线鳞型　鲫鳞被的基因型应为SSNn或SsNn。 关键词：　鲫；鳞被；基因型；mtDNA；碱基序列；同工酶 　项目：　科技基础条件平台：水产种质资源平台（2014DKA30470）；天津市星火计划项日“　鲫良种繁育及健康养殖技术示范”（09ZHXHNC05100）；　星火计划项日“　鲫工厂化育苗及健康养殖技术示范”（2010GA610007）；天津市农业科技示范推广项日“　鲫良种繁育及健康养殖技术推广”（201001010）；　级科技计划项日“水产品健康养殖、加工与质量安个控制产业化示范”（2013G A610003）。 通讯 　鲫为　级天津市换新水产良种场培育的以框鳞镜鲤为母本、红鲫为父本的杂交种，2007年被　认定为养殖新品种（品种登记号：GS02-001-2007）。鱼体背部及两侧呈浅黄色，腹部银灰色，体被全鳞，鳞片中等大小，侧线鳞31～34枚[1-2]。2013年11月份在天津市两个养殖场养殖的　鲫中发现有线鳞型个体（90尾中有6尾线鳞型个体，占6.67%）。 鲤鱼中依据鳞被特征可以分为鳞鲤（scaled carp）、线鳞镜鲤(linear mirror carp)、散鳞镜鲤(scattered mirror carp)和革鲤（leather carp）或裸鲤（nude carp）共四种类型，其中线鳞镜鲤和裸鲤均含有N基因，而楼允东认为在我国用于杂交的鲤鱼品种不包括线鳞镜鲤和革鲤[3-4]。至今在我国鲤鲫杂交子代中没有　线鳞型个体的报导。mtDNA为母性遗传，其D-loop以及COⅠ等区段的序列分析可以作为种类鉴别的DNA条形码[5-10]。同工酶可以有效鉴别鲤鲫杂交种[11-14]。 为探讨线鳞型个体是否属于　鲫，是否具有　鲫的遗传结构，鳞被遗传特点如何，本研究以3尾全鳞型　鲫以及3尾线鳞型个体（以下也称为　鲫）为实验材料进行了mtDNA D-loop及其邻近区段的PCR扩增和序列测定，与GenBank上的鲤鱼、鲫鱼的相应区段进行了序列比较。同时检测了两种类型　鲫肌肉的GPI和LDH同工酶。以期为　鲫的种质鉴定以及鲤、鲫鱼遗传育种工作提供依据。 1材料与方法 1.1试验鱼 于2013年11月从天津市某鱼类养殖场采集3尾全鳞型　鲫以及3尾线鳞型　鲫（图1、表1)。鲜活状态下剪取大小约1.0 cm×0.5 cm的鳍条用于DNA提取，-20 ℃冷冻保存鱼体用于同工酶的检测。 1.2DNA的提取、mtDNA D-loop及邻近区段PCR扩增 用苯酚-氯仿抽提法从鳍条提取总基因组DNA，4 ℃下保存备用[15]。以提取的DNA为模板，使用L15923和H1067引物对每尾试验鱼的mtDNA D-loop及其邻近区段进行扩增，两个引物的结合位点分别位于tRNAThr和12S rRNA 编码区上。将PCR产物委托深圳华大基因科技有限公司纯化并测序，得到的序列依据峰图进行确认[9]。 1.3DNA序列分析 使用MEGA6.0软件对6个　鲫序列、GenBank上的3个鲤鱼序列（KC292935、KC292936和X61010.1）和3个鲫鱼序列（KC292946、KC292947和KC292948）进行比对分析，计算6尾　鲫与鲤鱼、鲫鱼的遗传距，构建NJ树[16]。 1.4同工酶电泳 使用水平式淀粉凝胶电泳法（缓冲液为C-AP