原创力文档- 6
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- 2023-04-11 发布于四川
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WB实验的基本原理及操作流程
【实验原理】
一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶) 。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要
标志，检测蛋白质的方法很多，除ELISA法外，也可用与检测DNA 和RNA 相类似的吸印方
法。前两法有“南”和“北”之意，故本法遂被延伸称为Western(西)印迹法，该法能用SDS 聚
丙烯酰胺凝胶电泳分辨出与专一抗血清结合的专一性蛋白质。将聚丙烯酰胺凝胶上分辨出的
蛋白质转移到硝酸纤维素膜上并与第一抗体共孵。第一抗体专一地与待分离蛋自质的抗原决
定簇结合，然后用另一种蛋自质，如135I-蛋白A 或辣根过氧化物酶连接的山羊抗IgG 检测
已结
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