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2019年卫生资格病理学技术职称考试复习重点 冰冻切片 是免疫组织化学染色中最常用的一种切片方法。其最突出的优点是能 够较完好地保存多种抗原的免疫活性，尤其是细胞表面抗原更应 采 用冰冻切片。新鲜的组织及已固定的组织均可作冰冻切片。 冰冻时，组织中水份易形成冰晶，往往影响抗原定位。一般认为冰晶 少而大时，影响较小，冰晶小而多时，对组织结构损害较大，在含水 量较多的组织中上述现象更易发生。冰晶的大小与其生长速率成正 比，而与成核率(形成速率)成反比，即冰晶形成的数量愈多则愈小， 对组织结构影响愈严重。因此，应尽量降低冰晶的数量。Fish认为冰 冻开始时，冰晶成核率较慢，以后逐渐增加，其临界温度为-33。C, 从 -30。C 降至-43。C之间，成核率急剧增加达1018，然后再减慢。基 于上述理论可采取以下措施减少冰晶的形成。 (1)速冻，使组织温度骤降，缩短从-33。C43。C的时间，减少冰晶的 形成。其方法有二： ①干冰-丙酮(酒精)法：将 150-200ml 丙酮(酒精)装入小保温杯内，逐 渐加入干冰，直至饱和呈粘稠状，再加干冰不再昌泡时，温度可达 -70℃C，用一小烧杯(50-100ml)内装异戊烷约50ml，再将烧杯缓慢置 入干冰丙酮(纯酒精)饱和液内，至异戊烷温度达-70℃时即可使用。将 组织(大小为1cm×0