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新人教版 高中生物 选择性必修3第二章 ——细胞工程第1节 植物细胞工程第1课时 植物细胞工程的基本技术咏怀兰为王者香,芬馥清风里。从来岩穴姿,不竞繁华美。植物组织培养技术 思考:高洁、典雅的兰花颇受人喜欢。但其繁殖率低,价格不菲,如何让它大量、快速地繁殖呢?1.细胞工程的概述原理 细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。目的操作水平动物细胞工程植物细胞工程植物体细胞杂交植物组织培养2.细胞工程的发展历程土壤农杆菌的Ti质粒被发现。之后,该质粒应用于植物分子生物学领域,促进了植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合。1974年卡尔森诱导烟草种间原生质体融合,获得了第一株体细胞种间杂种植株。1971年古哈等在培养毛曼陀罗的花药时,首次得到了由花药中的花粉粒发育而来的胚。1964年1960年科金用真菌的纤维素酶分解番茄根的细胞壁,成功获得了原生质体1958年斯图尔德等发现胡萝卜的体细胞可以分化为胚,为细胞全能性理论提供了强有力的支持。1902年哈伯兰特提出细胞全能性的理论,但相关实验尝试没有成功。外植体1.植物组织培养 是指将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。植物细胞的全能性无性生殖有丝分裂原理生殖方式分裂方式讨论:植物的组织培养原理?原理:植物细胞的全能性体现全能性的标志必修1-P121——细胞经分裂和分化后,仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。2.细胞全能性 细胞经过分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能 原因每一个细胞含有控制该生物发育的全部基因原因:在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性表达——如何才能让细胞表现出全能性?比较生物体内细胞并不都表现全能性(1)受精卵>胚胎干细胞>生殖细胞>体细胞(2)植物细胞>动物细胞1958年Steward利用胡萝卜韧皮部诱导分化产生了胚状体,这是人类第一次获得了人工胚状体,并获得个体植株。(必修一 P118-121)无菌环境适宜的温度、pH、无菌等外界条件一定的营养物质、植物激素离体3142植物细胞表现出全能性的条件:种子萌发成幼苗,能否体现细胞的全能性?自主阅读教材35页—36页,小组思考并讨论以下问题:1、概述植物组织培养的基本过程?2、决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么?3、在组织培养实验中,为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作?3.植物组织培养的流程脱分化再分化已分化细胞,失去其特有结构和功能而转变成未分化的细胞的过程。脱分化:注意:过程中涉及的生命活动只有细胞增殖(有丝分裂),没有细胞分化。 该培养过程一般不需要光照接种外植体诱导愈伤组织移栽成活诱导生芽诱导生根细胞排列疏松且无规则、高度液泡化、不定形的薄壁组织团块。愈伤组织:愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。再分化:注意:过程中涉及的生命活动:既有细胞增殖(有丝分裂),又有细胞分化。 需要给予适当光照,诱导叶绿素的合成,使试管苗能够进行光合作用。包括无机营养成分(水和无机盐)、有机营养成分(蔗糖、氨基酸、维生素等)、特定浓度和比例的激素(主要是生长素和细胞分裂素);植物组织培养常用的培养基配方 P116⑴培养基名称: ;⑵物理性质: ;⑶碳源: 。蔗糖的作用:作为碳源,提供能量,调节渗透压菊花的组织培养探究·实践生长素根分化愈伤组织 芽分化细胞分裂素巧记:高根低芽中愈伤探究·实践菊花的组织培养1.植物激素的作用: 生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。它们的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向。生长素用量 / 细胞分裂素用量结果比值≈1比值>1比值<1促进愈伤组织的形成促进根的分化促进芽的分化材料:幼嫩的菊花茎段探究·实践菊花的组织培养酒精无菌水洗无菌水次氯酸钠溶液2.方法步骤2-3次30min2-3次30s消毒:①制备外植体切割:无菌操作目的防止杂菌生长。一方面与培养物竞争营养;另一方面产生有害物质危害培养物。探究·实践菊花的组织培养2.方法步骤为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养? 有光时,往往容易形成维管组织, 而不易形成愈伤组织。②接种到诱导愈伤组织培养基脱分化(避光)超级工作台无菌操作产生愈伤组织探究·实践菊花的组织培养2.方法步骤③接种到诱导生芽培养基诱导生芽④接种到诱导生根培养基若先生根后面就不易生芽诱导生根探究·实践菊花的组织培养2.方法步骤 ⑤移栽 移栽前先打开封口膜或瓶盖,让试管苗在培养箱内生长几日。用流水清洗掉根部的培养基后,将 幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中,待其长壮后再移栽入土。每天观察
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