西南林大现代生化仪器分析课件02紫外可见分光光度法.pptVIP

* * 紫外可见分光光度法 紫外可见分光光度法是在比色法的基础上发展起来的；它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性定量分析及结构分析。所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。 电子能级的能量差ΔΕe较大,1～20eV。电子跃迁产生的吸收光谱在紫外—可见光区，称为紫外—可见光谱或分子的电子光谱； 振动能级的能量差ΔΕv约为：0.05～１eV，跃迁产生的吸收光谱位于红外区，为红外光谱或分子振动光谱； 转动能级间的能量差ΔΕr：0.005～0.050eV，跃迁产生吸收光谱位于远红外区。称为远红外光谱或分子转动光谱； 分子能级 分子从外界吸收能量后，就能引起分子能级的跃迁，即从基态能级跃迁到激发态能级。分子可吸收二个能级之差的能量。 例：5ev能量其相应的波长为： 电子能级跃迁所需的能量较大，其能量一般在1-20eV。故产生的吸收光谱主要处于紫外、可见光区（200-780 nm），这种分子光谱称为电子光谱或紫外可见光谱。 ΔΕeΔΕvΔΕr 一、紫外可见吸收光谱:由分子价电子能级跃迁而产生的吸收。 波长范围：100-800 nm. (1) 远紫外光区: 100-200nm