黄孢原毛平革菌培养实验要点.pdfVIP

黄孢原毛平革菌的培养实验 关键词：显微镜 三角瓶 ATCC 北京标准物质网 一、黄孢原毛平革菌 试验所用菌种黄孢原毛平革菌 BKM-F-1767，密封，置于冰箱中。 二、黄孢原毛平革菌的培养基 1．黄孢原毛平革菌培养基的组成 基本培养基：2.O 马铃薯浸出液，20 葡萄糖，3 KH PO ，1．5 MgSO ·7HO， 2 4 4 2 0.1m FeSO ·7HO，0.2m CuSO ·5HO，8m 维生素 B1，用蒸馏水定容到 1000mL。 4 2 4 2 -1 斜面孢子培养基：采用改良PDA 培养基 (L )：200 马铃薯浸出液，20 葡 萄糖，20 琼脂，3g KH PO ，1.5g MgSO ·7HO，0.1mgFeSO ·7HO，0.2m 2 4 4 2 4 2 CuSO ·5HO，8m 维生素 B1。 4 2 2．培养基的消毒灭菌 为了对微生物进行纯培养，防止杂菌污染，必须对微生物生长的培养基进行 消毒灭菌。培养基的消毒灭菌步骤如下：将装有液体培养液的锥形瓶塞上棉塞， 罩上牛皮纸，用线扎紧。首先在高压灭菌锅内放水，使水面超过加热电阻丝两指 左右，放置好锅内桶，在锅内放入待灭菌的培养基和需消毒的物品，盖好锅盖， 拧紧螺钉，打开放气阀。然后接上电源，待水烧开 3min 后 (将锅内冷空气赶出后)， 关闭放气阀，待压力升高。当温度指到 121℃，压力为 0．1 5MPa 时，使温度压 力恒定。从这时计时 25min，关掉电源，等锅内温度冷却下降至 0℃刻度，打开 放汽阀放气，打开锅盖．再取出培养基及消毒物品。至此，消毒灭菌完毕。 所谓“白腐真菌”，并非生物学上的概念。 第一，它不属于生物系统分类学范畴的术语，而是从功能角度上对生物进行 描述和界定。 第二，它既不专指某一种真菌，也不泛指某一些真菌，而是限定为一类腐生 在木质上有相同的进攻能力并造成木质发生相同的结构及外观变化——白腐的 丝状真菌的总称。 白腐真菌是木腐真菌中对木质素降解能力最强的成员，是已知的能在纯培养 中将木质素彻底降解为CO 和 H O 的唯一的一类生物，因分解术材后留下的残留 2 2 物为白色而得名。虽然其中的某些种相对于纤维素类成分而言更偏分解木质素， 但是它们在腐烂木质过程中几乎是同时破坏多糖和木质素，即能在一定条件下将 木质的主要成分 (木质素、纤维素、半纤维素)全部降解为 CO 和 H O，因在分解 2 2 过程中木质不被着色，故仍保持白色 黄孢原毛平革菌是白腐真菌的模式菌种，属担子菌纲，典型的木质素降解菌， 一般腐生于树木或木材上，使木材上出现袋状、片状或有环痕状等形状的淡色海 绵状团块 黄孢原毛平革菌具有发达的菌丝体 菌丝常为多核，一个细胞内随机 分布可多达 15 个核，少有隔膜，无锁状联合。多核的分生孢子常为异核体，担 孢子却是同核体 交配系统有同宗配合和异宗配合 在合适的培养条件下，菌丝 生长旺盛，且喜欢在空气和水的界面上伸展，容易产生大量的无性分生孢子 分 生孢子为具有疏水性且直径 5～7 μm 的卵形颗粒；孢子表面有小杆状结构，带 负电荷，等电点接近 2．5；表面组成为 35％的蛋白质，20％的多糖，33％的类 烃物质 分生孢子容易形成及具有数量很大的特点，为苗的种质保存、接种量化 和遗传操作提供很大的便利 在整个生活周期中，黄孢原毛平革菌的子实体阶段并不占主要地位，Gold 等研究了其子实体形成的生理条件，试验表明：通过对葡萄糖和氮代谢物的抑制， 可以控制菌的子实体形成，菌的子实体形成及以后的担孢子的生成。常 10～14d 内可诱导完成：碳源对子实体形成有很大的影响，其中Walseth