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RNA干扰载体的构建的实验流程--第1页 RNA干扰载体的构建的实验流程 RNA干扰载体主要用来研究基因表达调控，RNA干扰技术已已被广泛 用于基因结构功能研究和传染性疾病及基因治疗领域，进行RNA干扰 实验首先是构建RNA干扰载体，本文以pRI系列载体为例论述了干扰 载体的构建的实验流程。 产品技术背景 pRI系列载体是基于 III类rna聚合酶启动子：人类H1启动子的专 用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合 成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始 位点和终止信号，H1启动子转录产物精确生成人工设计的shRNA， shRNA经过RISC剪切后形成有2个U突出末端的成熟siRNA。由于 H1启动子对转录产物长度的严格限制，基本上杜绝了非特异性干扰 片段的产生，将载体转染细胞后对其它基因的影响降到最低。 pRI系列载体已经成功用于多种哺乳动物细胞进行基因的RNA干扰。 本系列中含有新霉素抗性基因的载体用于稳定表达siRNA，可以在更 长时间内对基