DB37T 4600.3-2023 饲料中违禁物质检测 第3部分：大环内酯类.docxVIP

ICS65.120CCSB 46 ICS 65.120 CCS B 46 山 东 省 地 方 标 准 DB37/T 4600.3—2023 饲料中违禁物质检测 第 3 部分：大环内酯类 Determination of forbidden substances in feeds—Part 3: Macrolides 2023 - 04 - 16 发布 2023 - 05 - 16 实施 山东省市场监督管理局 发 布 DB37/T 4600.3 DB37/T 4600.3—2023 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。 本文件是DB37/T 4600《饲料中违禁物质检测》的第3部分。DB37/T 4600已经发布了以下部分： ——第3部分：大环内酯类。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由山东省畜牧兽医局提出并组织实施。 本文件由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。 I 引 言 近年来，作为饲料添加剂的大环内酯类药物成为我国乃至世界范围内需求量和销售速度增长最快的抗生素之一。但长期使用这类抗生素不仅在动物体内造成残留，还会随粪便排出体外进而污染环境，导致微生物菌群的失调和革兰氏阳性菌耐药性的增加，对动物及人类健康产生危害。目前还没有针对饲料中大环内酯类药物残留检测的方法标准。因此，研究饲料中红霉素、罗红霉素、竹桃霉素、泰乐菌素、替米考星、交沙霉素留限量及其检测技术，对于控制动物源性食品药物残留，保证食品质量安全和消直接费者食用安全有着重要的意义。 II 饲料中违禁物质检测 第 3 部分：大环内酯类 范围 本文件规定了饲料中罗红霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙毒素、竹桃毒素、红霉素6种大环内酯类药物测定的高效液相色谱-串联质谱法。 本文件适用于配合饲料、浓缩饲料中罗红霉素、替米考星、泰乐菌素、交沙毒素、竹桃毒素、红霉素6种大环内酯类药物的测定。 本方法检出限为5 μg/kg，定量限为10 μg/kg。 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 原理 用乙腈提取样品中大环内酯类药物，固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱测定，外标法定量。 试剂或材料 除非另有说明，在分析中所用试剂均为分析纯和符合GB/T 6682 规定的一级水。 5.1 乙腈（CH3CN，75-05-8）：色谱纯。 5.2 甲酸（HCOOH，64-18-6）：色谱纯。 5.3 甲醇（CH3OH，67-56-1）：色谱纯。 0.1 mol/L 氢氧化钠溶液。 称取4.0 g氢氧化钠，并用水稀释至1 L，摇匀。 磷酸盐缓冲溶液：0.1 mol/L。 称取6.0 g磷酸氢二钠溶解于450 mL水中，用氢氧化钠调节pH=8，用水定容至500 mL，摇匀。 0.1 %甲酸溶液。 准确吸取甲酸（5.2）1 mL加水至1 000 mL，摇匀。 0.1 %甲酸-乙腈溶液。 0.1 %甲酸溶液（5.6）+乙腈（5.1）=50+50，摇匀。 标准储备溶液：1.0 mg/mL。 1 准确称取罗红霉素（CAS编号：80214-83-1，纯度≥95 %）、替米考星（CAS编号：108050-54-0， 纯度≥95 %）、泰乐菌素（CAS编号：1401-69-0，纯度≥95 %）、交沙霉素（CAS编号：16846-24-5，纯度≥95 %）、竹桃霉素（CAS编号：7060-74-4，纯度≥95 %）、红霉素（CAS编号：114-07-8，纯度≥95 %） 标准品各约10 mg（精确至0.01 mg），分别置于10 mL容量瓶中，用乙腈溶解定容。 于-18 ℃以下保存，有效期为3个月。 标准中间溶液。 准确吸取适量标准储备溶液（5.8）， 用乙腈配制成浓度为10 μg/mL的标准中间溶液。4 ℃保存，有效期为1个月。 标准工作液。 用空白样品提取液分别配成浓度为1 ng/mL，5 ng/mL，10 ng/mL，50 ng/mL，100 ng/mL的标准工作溶液，现用现配。 聚苯乙烯二乙烯基苯吡咯烷酮填料固相萃取柱或者相当者：60 mg/3 mL。 仪器设备 高效液相色谱-串联质谱仪：三重四级杆质谱检测器，配有电喷雾离子源（ESI）。 分析天平：感量分别为 0.01 mg 和 0.01 g。 离心机