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甘氨酸的含量测定——电位滴定法之宇文皓月创作 生药 1011 第四组 一、应用范围： 本方法采取滴定法测定甘氨酸原料药中甘氨酸的含量。 本方法适用于甘氨酸原料药。 二、方法: 供试品无水甲酸溶解后，加冰醋酸，照电位滴定法，用高 氯酸滴定液滴定，并将滴定的结果用空白试验校正，根据滴定 液使用量，计算甘氨酸的含量。 三、原理： 氨基酸分子中含有一NH 和一COOH，为两性物质，在水溶液 2 中，它的酸式电离和碱式电离的趋势都很弱(如氨基乙酸其羧基 -10 -12 上的氢Ka=2．5×10 ，氨基作为碱Kb=2．2×10 )，因此无法 准确滴定。 但在非水介质 (如冰乙酸)中，可以用HC10 作滴定剂，结晶 4 紫为指示剂准确滴定氨基酸，产品为氨基酸的高氯酸盐，呈酸 性。 结晶紫在强酸介质中为绿色，pH=2左右为蓝色，pH3时为 紫色，可以指示此反应的滴定终点。 (由紫色到蓝色到蓝绿到绿 色到黄色变更) 四、实验资料 1、试剂： （1）冰醋酸 （2）无水甲酸 （3）高氯酸滴定液（0.1mol/L） （4）结晶紫指示液 （5）基准邻苯二甲酸氢钾 2、仪器设备：电位滴定仪、酸度计或电位差计、容量瓶、烧 杯、磁力搅拌器、搅拌子等 五、操纵步调 1.高氯酸滴定液（0.1mol/L）试样制备 配制：取无水冰醋酸（按含水量计算，每 1g 水加醋酐 5.22mL）750mL，加入高氯酸（70~72%）8.5mL，摇匀，放冷， 加无水冰醋酸适量使成 1000mL，摇匀，放置 24 小时。若所测 供试品易乙酰化，则须用水分测定法测定本液的含水量，再用 水和醋酐调节至本液的含水量为 0.01%~0.2%。 2.结晶紫指示液 取结晶紫 0.5g，加冰醋酸 100mL 使溶解。 3.标定：取在 105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约 0.16g，精密称定，加无水冰醋酸 20mL 使溶解，加结晶紫指示 液 1 滴，用本液缓缓滴定至蓝色，并将滴定结果用空白试验校 正。每 1mL 高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于20.42mg 的邻苯 二甲酸氢钾。根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量， 算出本液的浓度。 4.酸度计的校正 （1）接通电源，开机预热5min。 （2）用蒸馏水冲洗电极，并用滤纸吸干，然后将电极放入pH 已知的尺度缓冲溶液中（ H 6.864）摇动烧杯，使电极前端玻 P 璃球与尺度缓冲溶液充分接触。转动标定旋钮，使仪器度数等 于尺度缓冲溶液的 pH 值。标定完成后将电极清洗干净，并用滤 纸吸干。同样的方法再标定 pH 4.003 的尺度缓冲液。 5.供试品的电位滴定 精密称取供试品约 70mg，加冰醋酸 25mL，照电位滴定法，用高 氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校 正。每 1mL 高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于 7.507mg 的 C H NO 。 2 5 2 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之 一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家尺度中对 该体积移液管的精度要求。 六、实验结果 1.原始数据 （1）标定 项目 标定1 标定2 平均值 HC10 滴定量 ／mL 5.5 5.4 5.45 4 （2）电位滴定 V/mL 0 2 4 5 6 6.3 6.5 6.7 6.9 7 E/mv 362 386 412 431 485 526 585 624 645 652 2.数据处理 （1）标定