His-CCL5蛋白的纯化及鉴定.docxVIP

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2023-05-01 发布于湖北
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His-CCL5蛋白的纯化及鉴定摘要：趋化因子CCL5具有介导免疫细胞定向趋化的作用，研究表明血清中CCL5的表达水平与胃癌、乳腺癌等恶性肿瘤分期及疾病进展相关，CCL5可能成为预测相关肿瘤预后的分子标志。本文旨在利用实验室前期构建的pET-30a-CCL5原核表达载体，通过亲和层析法纯化His-CCL5重组蛋白，并通过Western Blot进行鉴定。将重组质粒pET-30a-CCL5转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中，通过优化重组蛋白的最适表达温度和IPTG浓度，最终确定His-CCL5在25℃、0.1mmol/L IPTG条件下以可溶蛋白的形式大量表达。利用Ni2+-NT