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弃我去者昨日之日不可乱我心者今日之日多烦忧
附件1标本采集和保存技术要求一览表
病人
类型
种类
米集时间和频次
米集方法
保存条件
备注
所有病例
全血
1、入院后立即采集;
2、间隔3-5天采集
一次;
3、逝前采集次。
真空采血管无菌采集
血清分装2管
血块单独保存
低温保存,-70°C最佳,-20C亦可
血块用于细菌检测
抗凝
血
入院后立即采集
真空抗凝采血管无菌采集最好在使用抗生素前采血
同上
传染病所要求如5天内能送达实验室,可0C~10C保存,如否,可低温冷冻保存
咽拭子
入院后立即采集
塑料杆拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将拭子头分别浸入含3ml病毒或细菌
同上
详见表下注。
病人
类型
种类
米集时间和频次
米集方法
保存条件
备注
米样液的螺口塑料管中
漱口液
入院后立即采集
10ml不含抗菌素的米样液漱口,无菌螺口塑料管收集
同上
详见表下注。
尿标本
1、入院后立即采集;
2、临床检查采集标本时留样
无菌管采集中段尿标
本10ml
同上
详见表下注。
便标本
1、入院后立即采集;
2、临床检查采集标本时留样
无菌管采集粪便标本
同上
详见表下注。
下呼吸道标本
气管插管时采集
采集呼吸道抽取物或分泌物
同上
详见表下注。
痰液
有痰液时采集
同上
详见表下注。
心脏穿刺组织
死亡后未做尸检时采集
同上
详见表下注
肺穿刺组织
心包液
胸腔积液
尸检标本
2份同上,1份福尔马林充分固定后,
4C保存
应尽量多采集各器官组织标本,例如肺组织、胸腔积液、心脏组织、心包液、肝、肾、脾组织,如果有神经系统表现,还需采集脑组织以及其它可能受累的器官标本
有明确脑膜脑炎或脑炎
脑脊液
急性期
无菌采集
同上
病人
类型
种类
米集时间和频次
米集方法
保存条件
备注
症状病例
有出疹症状病例
疱疹液
有疱疹时
无菌采集
同上
注:
1、以上标本分别用于开展病毒和细菌等病原体检测2、采集咽拭子标本、下呼吸道标本、痰液、心脏穿刺组织、肺穿刺组织、心包液、胸腔积液使用的样品保存液应不含抗生素或不用样品保存液,现场无菌接种,并将接种后剩余的标本立即冷冻(20°C以下)保存。漱口液、尿标本和粪便标本现场无菌接种,并将接种后剩余的标本立即冷冻(-20C以下)保存。
附件2手足口病例标本送检登记表
患者姓名性别
患者姓名性别出生日期.
家长姓名家庭住址市—
家庭电话
发病日期年—月—日
初诊日期年—月日;初诊单位
断:
—年月日(阴/阳历)
乡(镇、街办)村(居)号
(省级/市级/县级/乡级/村级)初步诊
住院治疗(是/否),如住院,则:
入院日期年—月—日,入院诊断,
出院日期年—月—日,出院诊断.
病程天预后:痊愈/好转/未愈/死亡/其他;后遗症(有,;无)标本统一编号:
标本类型
采样日期
送检日期
是否冷藏
标本量
收样日期
检测日期
报告日期
实验结果
RD
HEp-2
中和抗体滴度
咽拭子
血
清
急性期
恢复期
粪便标
本脑脊液
疱疹液
注:送检标本编号为“标本统一编号+标本类型”,其中“T”为咽拭子代码,“S1”为急性期血清代码,“S2”为恢复期血清代码,“F”为粪便标本代码,“CSF”为脑脊液代码,“H”为疱疹液代码。
采样人:采样单位:送样人:
附件3手足口病实验室检测方案
(试行)
为规范手足口病的标本采集、运送及实验室检测操作程序,提高检测准确性,从而为手足口病的明确诊断和相关实验研究提供可靠的依据,特制定本方案。
手足口病的实验室检测原则和程序
手足口病的诊断一般是通过采集适当的临床标本后进行病毒分离和病毒鉴定,如果没有采到合适的临床标本,或无法进行病毒分离,也可以通过血清学检测(如中和实验)来检测血清中的中和抗体,或直接从临床标本中检测病毒的核酸来诊断(见下图:手足口病的实验室诊断流程图)。
一般是由省级病毒实验室进行病毒的分离,爆发疫情范围较大时,国家参比实验室也可以提供技术支持。病毒分离成功后,送至国家参比实验室进行鉴定或复核,同时对全国手足口病的病原进行病毒学监测。国家参比实验室接到标本后,在30日内将结果反馈给省级实验室。
很多血清型的肠道病毒能引起手足口病,不同细胞系对不同病毒的敏感性是有所不同的,而不同时期肠道病毒的流行株也不同。通常用于肠道病毒分离的细胞系为RD细胞(对CA16和EV71敏感)、HEp-2细胞(对某些柯萨奇B组病毒敏感)等,联合使用上述两种或更多细胞(如Vero细胞)有助于分离到更多的肠道病毒。
使用血清型特异性的中和抗血清进行的中和实验是肠道病毒鉴定的基本方法,如果使用了适当的抗血清,实验结果是比较可靠的。因为肠道病毒包括若干个血清型,通常使用组合抗血清进行鉴定,有些组合抗血清已经商品化。
当无法进行病毒分离或得不到适用于病毒分离用的标本时,血清学检测可以为肠道
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