洁净手术室空气采样方法.docx

洁 净 手 术 室 空 气 采 样 方 法 1、采样时间：消毒后、操作前进行采样。 2、采样方法： 布点： 室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线 3 点，内外点距墙 1m；室内面积 30 m2，设四角及中央 5 点，四角点距墙 1m。 平板暴露法 平板直径 9cm、采样高度 1.5m，暴露 5min。3、检验方法 平板 37℃培养 48h。计数菌落数并分离致病菌。4、平板暴露法结果计算 50000N 细菌总数（cfu/m3）=A×T A 为平板面积（cm2）； T 为暴露时间（min）；N 为平均菌落数（cfu） 5、结果判定 I、II 类区域，细菌总数≤10cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。 （2）III 类区域，细菌总数≤200cfu/cm3，并未检出致病菌为消毒合格。 （3）IV 类区域，细菌总数≤500cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。 6、注意事项：采样前关好门窗，在无人走动的情况下，静止 10min 进行采样层流手术室空气日常监测方法： 要求日常实行动态监测，必测项目为平板采样法（沉降法）或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。 回风口动态平板采样法：应在手术开始、手术 2 小时、手术结束前抽检 3-4 次。每个回风口中部摆 放 3 个倾斜 30℃，Φ90 培养皿，暴露 30 分钟后，37°C 培养 24 小时。 标准：每皿菌落计数平均值应符合表 4 标准要求。单皿最大值不应超过平均值 3 倍。 动态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术进行 4 小时等， 选择不少于 3 个程序，测定细菌菌落总数。 标准：I 级30cfu/m3 ；II 级150 cfu/m3；III 级450 cfu/m3；IV 级500 cfu/m3。 其他洁净用房在当天上午10 时和下午 4 时各测 1 次，在每个回风口中部摆放 3 个 Φ90 培养皿，沉降 0.5h 后在 37℃下培养 24h。 标准：同回风口动态平板采样法标准。 层流手术室静态（空态）时空气采样方法： 1、采样方法： 当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；当送风口分散布置时，按全室统一布点方 法检测。 沉降法采样时，用直径 9cm 的培养皿，在空气中暴露 30min，37℃培养 24h，培养皿中的菌落数 （cfu）代表空气中沉降下来的细菌数，以个/皿表示。 浮游法采样时，用裂隙采样器在空气中随机采样 30min，对采样皿或采样条培养得出的菌落数 （cfu），代表空气中浮游下来的细菌数，以个/m3 表示。 2、采样高度： 采样点可布置在地面上或不高于地面 0.8m 的任意高度上； 在手术区检测时应无手术台；当手术台已固定时，检测高度应在台面之上 0.25cm。3、布点方法： 洁净手术室空气采关布点位置与方法 区域 最少测点数 手术区图示Ⅰ级 洁净手术室 5 点（双对角线布点） 手术区和洁 净辅助用房 8 点（每边内 2 点） 局部 100 级区Ⅰ级 周边区 Ⅱ～Ⅲ级 洁净手术 3 点（单对角线布点） 集中送风面正投影区室手术区 6 点（长边内 2 点，短边内 1 点） 集中送风面正投影区 Ⅱ级 周边区 4 点（每边内 1 点） Ⅲ级 周边区 Ⅳ级洁净手术室及分散 4 点（避开送风口正下方） 布置送风口的洁净室面 2 点（避开送风口正下方） 积＞30 ㎡ 面积≤30㎡ 注：分布在集中送风面正投影区角的采样点距离邻近两边的距离位 0.12 米 4、采样注意事项： 在 100 级区域检测时，采样口应对着气流方向；在其他区域检测时，采样口均向上； 采样后的培养基条或培养皿，应 37℃条件下培养 24h，并计算菌落数，菌落数的平均值均四舍五入选位到小数点后 1 位； 当采用浮游法测定浮游菌浓度时，细菌浓度测点数应和被测区域的含尘浓度测点数相同，且宜在 同一位置上。每次采样应满足表 8 的最小采样量的要求，每次采样时间不应小于 30 分钟。 当用沉降法测定沉降菌浓度时，细菌浓度测点数即要不少于含尘浓度测点数，应满足表 9 规定的最少培养皿数的要求（不含对照皿）。如沉降时间适当延长，则最少要求培养皿数可按比例减少，但不能少于含尘浓度的最少测点数。 不论用何种方法检测细菌浓度，都必须有两次空白对照。第一次用于检测培养皿或培养基条（每批一个对照皿（条））；第 2 次对操作过程做对照试验（每室或每区将 1 个对照皿（条），打开后又立即封盖，进行模拟操作）；两次对照结果必须为阴性，整个操作过程应符合无菌操作的要求。 新房验收时，应最后做空气、物表细菌检测。