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洁 净 手 术 室 空 气 采 样 方 法
1、采样时间:消毒后、操作前进行采样。
2、采样方法:
布点:
室内面积≤30 m2,设内、中、外对角线 3 点,内外点距墙 1m;室内面积 30 m2,设四角及中央 5 点,四角点距墙 1m。
平板暴露法
平板直径 9cm、采样高度 1.5m,暴露 5min。3、检验方法
平板 37℃培养 48h。计数菌落数并分离致病菌。4、平板暴露法结果计算
50000N
细菌总数(cfu/m3)=A×T
A 为平板面积(cm2); T 为暴露时间(min);N 为平均菌落数(cfu)
5、结果判定
I、II 类区域,细菌总数≤10cfu/cm3,并未检出致病菌为消毒合格。
(2)III 类区域,细菌总数≤200cfu/cm3,并未检出致病菌为消毒合格。
(3)IV 类区域,细菌总数≤500cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。
6、注意事项:采样前关好门窗,在无人走动的情况下,静止 10min 进行采样层流手术室空气日常监测方法:
要求日常实行动态监测,必测项目为平板采样法(沉降法)或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。
回风口动态平板采样法:应在手术开始、手术 2 小时、手术结束前抽检 3-4 次。每个回风口中部摆
放 3 个倾斜 30℃,Φ90 培养皿,暴露 30 分钟后,37°C 培养 24 小时。
标准:每皿菌落计数平均值应符合表 4 标准要求。单皿最大值不应超过平均值 3 倍。
动态采样器法:浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术进行 4 小时等,
选择不少于 3 个程序,测定细菌菌落总数。
标准:I 级30cfu/m3 ;II 级150 cfu/m3;III 级450 cfu/m3;IV 级500 cfu/m3。
其他洁净用房在当天上午10 时和下午 4 时各测 1 次,在每个回风口中部摆放 3 个 Φ90 培养皿,沉降 0.5h 后在 37℃下培养 24h。
标准:同回风口动态平板采样法标准。
层流手术室静态(空态)时空气采样方法:
1、采样方法:
当送风口集中布置时,应对手术区和周边区分别检测;当送风口分散布置时,按全室统一布点方 法检测。
沉降法采样时,用直径 9cm 的培养皿,在空气中暴露 30min,37℃培养 24h,培养皿中的菌落数
(cfu)代表空气中沉降下来的细菌数,以个/皿表示。
浮游法采样时,用裂隙采样器在空气中随机采样 30min,对采样皿或采样条培养得出的菌落数
(cfu),代表空气中浮游下来的细菌数,以个/m3 表示。
2、采样高度:
采样点可布置在地面上或不高于地面 0.8m 的任意高度上;
在手术区检测时应无手术台;当手术台已固定时,检测高度应在台面之上 0.25cm。3、布点方法:
洁净手术室空气采关布点位置与方法
区域 最少测点数 手术区图示Ⅰ级 洁净手术室 5 点(双对角线布点)
手术区和洁 净辅助用房 8 点(每边内 2 点)
局部 100 级区Ⅰ级 周边区
Ⅱ~Ⅲ级 洁净手术 3 点(单对角线布点) 集中送风面正投影区室手术区 6 点(长边内 2 点,短边内 1 点) 集中送风面正投影区
Ⅱ级 周边区 4 点(每边内 1 点) Ⅲ级 周边区
Ⅳ级洁净手术室及分散 4 点(避开送风口正下方)
布置送风口的洁净室面 2 点(避开送风口正下方) 积>30 ㎡
面积≤30㎡
注:分布在集中送风面正投影区角的采样点距离邻近两边的距离位 0.12 米
4、采样注意事项:
在 100 级区域检测时,采样口应对着气流方向;在其他区域检测时,采样口均向上;
采样后的培养基条或培养皿,应 37℃条件下培养 24h,并计算菌落数,菌落数的平均值均四舍五入选位到小数点后 1 位;
当采用浮游法测定浮游菌浓度时,细菌浓度测点数应和被测区域的含尘浓度测点数相同,且宜在 同一位置上。每次采样应满足表 8 的最小采样量的要求,每次采样时间不应小于 30 分钟。
当用沉降法测定沉降菌浓度时,细菌浓度测点数即要不少于含尘浓度测点数,应满足表 9 规定的最少培养皿数的要求(不含对照皿)。如沉降时间适当延长,则最少要求培养皿数可按比例减少,但不能少于含尘浓度的最少测点数。
不论用何种方法检测细菌浓度,都必须有两次空白对照。第一次用于检测培养皿或培养基条(每批一个对照皿(条));第 2 次对操作过程做对照试验(每室或每区将 1 个对照皿(条),打开后又立即封盖,进行模拟操作);两次对照结果必须为阴性,整个操作过程应符合无菌操作的要求。
新房验收时,应最后做空气、物表细菌检测。
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