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酶法靶序列随机sgRNA文库的制备方法.pdfVIP

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  • 2023-05-05 发布于四川
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酶法靶序列随机sgRNA文库的制备方法.pdf

    本发明提供了一种酶法靶序列随机sgRNA文库的制备方法，其特征在于其步骤包括：采用随机切口酶Nt.CviPII对样本DNA目标序列的PAM区域进行切口；含BbsI酶切位点的接头磁珠连接片段化的DNA；BbsI切割释放DNA；随机引物延伸；连接含MmeI酶切位点的sgRNA骨架；MmeI切割释放原间隔区域；连接T7启动子序列；扩增获得含T7启动子的sgRNA文库模板；体外转录获得sgRNA文库。本发明的酶法靶序列随机sgRNA文库的制备方法，可以一次性制备随机覆盖目标区域的所有sgRNA组，具有成

    (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 114293264 A (43)申请公布日 2022.04.08 (21)申请号 202111586539.6 (22)申请日 2021.12.21 (71)申请人 翌圣生物科技（上海）股份有限公司

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