叶绿体色素理化性质.pptxVIP

叶绿体色素理化性质;实验目的;;实验材料：;本实验共有7项任务，按下列顺序做： 1、叶绿体色素提取 2、光对叶绿素的破坏作用 3、叶绿体色素的纸层析分离 4、叶绿素的荧光现象 5、皂化作用 6、吸收光谱观察 7、H+和Cu++对Mg++的取代作用 ;1、叶绿素提取原理与操作步骤; 叶绿体中含有绿色素（包括叶绿素a和叶绿素b，属于酯类化合物）和黄色素（包括胡萝卜素（烃类）叶黄素（衍生的醇类））两大类。它们与类囊体膜上的蛋白质相结合，而成为色素蛋白复合体。 基本性质：不溶于水，而溶于有机溶剂。 故可用乙醇或丙酮（含一定比例水分？）等有机溶剂提取。;提取步骤：;2.光对叶绿素的破坏作用; ;光对叶绿素的破坏操作步骤： 有太阳光时按照指导书的测定方法操作 稀释时不用严格定量？ 稀释1-2倍，为什么要稀释？; 水研磨匀浆 暗 光; 水研磨匀浆液; 因吸附剂（本试验为滤纸）对不同物质的吸附力不同，当用适当的溶剂推动时，混合物中各成分在两相（流动相和固定相）间具有不同的分配系数，所以它们的移动速度不同，经过一定时间层析后，便将混合色素分离。;再脱吸附; 叶绿体色素的结构决定极性。 极性决定在滤纸上的迁移速率。;叶绿素的化学结构;烃类;步骤一：;康维皿放置在培养皿内， 中央小室中加满推动剂 带纸捻的圆形滤纸平放在康维皿上， 使纸捻下端浸入推动剂中， 盖好培养皿(防推动剂蒸发) 推动剂前沿距滤纸边缘1/3时，取出滤纸， 风干，用铅笔标出各种色素的位置和名称 剪下一部分附到实验报告中。;;注意事项： 1、色素多涂抹几次，风干后再涂抹第二次。 涂抹的色素要适量，量太多易发生拖尾，量少色带看不清。 2、纸捻卷紧； 3、色素涂抹的宽度不要超过纸条的二分之一； 4、中心孔小而圆；平齐，勿突出； 5、分离时一定要盖严培养皿盖，防止推动剂蒸发。 细，匀，直，浓度适宜高。;4、叶绿素的荧光现象;;;5、皂化作用（绿色素与黄色素的分离）;做过荧光现象观察的色素乙醇提取液试管 加入2ml 20%KOH-甲醇溶液，充分摇匀 加入5ml苯，摇匀 沿管壁加入2ml蒸馏水，混匀 若溶液不分层，可用滴管沿管壁滴加蒸馏水 边滴加边摇动，直到开始分层 (如色素浓度大可再加1ml的KOH-甲醇溶液);注意：如果分层后下部的溶液浑浊，可以剧烈摇动，对试管加温，溶液很快分层，絮状物消失，溶液变得清澈透明。 原因：可能是温度较低引起的。 ;6、吸收光谱观察; 在阳光与三棱镜之间插入一支盛有叶绿素的试管，光谱中的红光与蓝紫光的部位会出现很深的黑带，表明这些光线已被叶绿素强烈吸收；而绿光部位没有黑带，即未被吸收。因此，叶绿素呈现绿色。 胡萝卜素与叶黄素主要吸收蓝紫光，基本上不吸收黄光，从而呈现黄色。;7、H+和Cu++对Mg++的取代作用;;1＃小试管;去镁叶绿素(CK2);加热时试管不能靠近火焰，温度过高将破坏叶绿素。;结果记录：填写记载表 ;洗刷干净，器皿摆放整齐。 研钵壁上易吸附色素，用什么洗刷？ 节约使用试剂。 ;谢谢观看！